ประวัติพอดคาสต์

ศาลเจ้าหวู่เหลียง - มุมมอง 3 มิติ

ศาลเจ้าหวู่เหลียง - มุมมอง 3 มิติ


We are searching data for your request:

Forums and discussions:
Manuals and reference books:
Data from registers:
Wait the end of the search in all databases.
Upon completion, a link will appear to access the found materials.

ภาพ 3 มิติ

ศาลเจ้าแห่งนี้เป็นส่วนหนึ่งของสุสานครอบครัวอันวิจิตรงดงาม ซึ่งปัจจุบันอยู่ทางตะวันตกเฉียงใต้ของมณฑลซานตง ประเทศจีน ราวปีค.ศ. มันยืนอยู่หน้าหลุมฝังศพของเจ้าหน้าที่ท้องถิ่นผู้เยาว์ กำแพงโบราณถูกปกคลุมไปด้วยฉากจากประวัติศาสตร์และตำนาน

สนับสนุนของเราองค์กรไม่แสวงหาผลกำไร

เว็บไซต์ของเราเป็นองค์กรไม่แสวงหาผลกำไร เพียง $5 ต่อเดือน คุณสามารถเป็นสมาชิกและสนับสนุนภารกิจของเราในการมีส่วนร่วมกับผู้คนด้วยมรดกทางวัฒนธรรมและปรับปรุงการศึกษาประวัติศาสตร์ทั่วโลก


วัดหวู่โหว

วัด Wuhou (วัด Marquis Wu) ในเขตชานเมืองทางใต้ของเฉิงตูเป็นวัดที่มีชื่อเสียงและมีอิทธิพลมากที่สุด ตั้งชื่อตาม Zhuge Liang ซึ่งอาศัยอยู่ตั้งแต่ พ.ศ. 181 ถึง 234 AD

เขาเป็นหนึ่งในบุคคลสำคัญทางประวัติศาสตร์ที่มีชื่อเสียงของจีน และเขาเป็นรัฐมนตรีและนักยุทธศาสตร์ทางการทหารที่มีชื่อเสียงของจักรพรรดิ Liu Bei (161-223) แห่งอาณาจักร Shu ในช่วงยุคสามก๊กในประเทศจีน วัดนี้อุทิศให้กับจักรพรรดิ Liu Bei ด้วย

มันถูกสร้างขึ้นในสมัยราชวงศ์ชิงในปี 1672 เนื่องจาก Zhuge Liang ได้รับตำแหน่ง "Wuxiang Hou" (Marquis Wuxiang) ในช่วงชีวิตของเขา วัดนี้จึงเรียกว่าวัด Wuhou Memorial Temple วัดนี้เป็นหนึ่งในสถานที่ท่องเที่ยวที่สำคัญของเฉิงตูและมีรูปปั้นมากมายของจักรพรรดิ Liu Bei, Zhuge Liang และเจ้าหน้าที่อื่น ๆ ของอาณาจักร Shu และยังมีจารึกและแผ่นจารึกโบราณที่มีชื่อเสียงในประเทศจีน

วัดหวู่โหว

นิทรรศการออนไลน์

นิเวศวิทยาของนิทรรศการ เป็นส่วนเติมเต็มให้กับนิทรรศการ ประเทศชาติของธรรมชาติ: ศิลปะและสิ่งแวดล้อมอเมริกัน. โดยใช้ ชาติของธรรมชาติ เพื่อเป็นข้อมูลอ้างอิง เว็บไซต์นี้จะตรวจสอบการตัดสินใจวางแผนที่สำคัญบางอย่างที่เกี่ยวข้องกับการสร้างนิทรรศการ และผลกระทบด้านสิ่งแวดล้อมที่เกี่ยวข้อง

ผลกระทบชั่วคราว เปิดการสำรวจประวัติศาสตร์ในวงกว้างของการทดลองที่จุดตัดของศิลปะและวิทยาศาสตร์ นิทรรศการออนไลน์ที่กว้างขวางนี้รวบรวมผู้เชี่ยวชาญจากวิทยาศาสตร์และประวัติศาสตร์ศิลปะเพื่อนำเสนอประวัติภาพวาดสุริยุปราคาของโฮเวิร์ด รัสเซลล์ บัตเลอร์ และเรื่องราวของศิลปินผู้สร้างสรรค์สิ่งเหล่านี้

คอลเลกชั่น Henry and Rose Pearlman นำเสนอผลงานชิ้นเอกของอิมเพรสชันนิสต์และโพสต์อิมเพรสชันนิสม์จากหนึ่งในคอลเลกชันที่ดีที่สุดที่ยังคงจัดขึ้นโดยเอกชน คอลเล็กชันนี้ประกอบด้วยภาพวาดและประติมากรรมโดยศิลปินที่เป็นสมาชิกแนวหน้าในยุคของพวกเขา เช่น Cézanne, Degas, Van Gogh, Modigliani และ Soutine ผลงานดังกล่าวได้รับการยืมตัวระยะยาวไปยังพิพิธภัณฑ์ศิลปะมหาวิทยาลัยพรินซ์ตันตั้งแต่กลางทศวรรษ 1970 และได้รับการจัดแสดงในนิทรรศการการเดินทางระหว่างประเทศที่สำคัญระหว่างปี 2557-2559 พร้อมด้วยเว็บไซต์ที่เหมาะกับอุปกรณ์พกพาซึ่งจัดแสดงผลงานชิ้นเอกสมัยใหม่ 50 ชิ้นจากช่วงปลายศตวรรษที่ 19 จนถึงต้นศตวรรษที่ 20 เว็บไซต์มูลนิธิ Henry and Rose Pearlman Foundation มีข้อมูลเชิงลึกเพิ่มเติมเกี่ยวกับคอลเล็กชัน

หนังสือกษัตริย์เปอร์เซียที่ยิ่งใหญ่ของพรินซ์ตัน บรรยายเรื่องราวของอิหร่านตั้งแต่เช้าตรู่จนถึงศตวรรษที่ 7 มหากาพย์ที่กว้างใหญ่นี้ประกอบด้วยโองการมากกว่า 50,000 ข้อและหางของกษัตริย์และวีรบุรุษโบราณของอิหร่านนับไม่ถ้วน การโต้ตอบสำรวจเรื่องราวที่น่าดึงดูดและรายละเอียดอันงดงามของภาพวาดหกภาพใน Peck Shahnama

เมืองที่สูญหายและถูกค้นพบถูกสร้างขึ้นเพื่อเสริมการจัดนิทรรศการ เมืองที่สูญหายและถูกพบ: ยึดครองนิวยอร์ก ชิคาโก และลอสแองเจลิส ปี 1960-1980 เพื่อให้โอกาสในการมีส่วนร่วมกับวัสดุทางประวัติศาสตร์ของนิทรรศการตลอดจนสภาพแวดล้อมในเมืองร่วมสมัย

สำรวจของหายาก อัลบั้มภาพวาดการ์ตูน Guercino ซึ่งประกอบด้วยภาพวาดล้อเลียน 23 ภาพโดยจิตรกรบาโรกชาวอิตาลี จิโอวานนี ฟรานเชสโก บาร์บิเอรี (ค.ศ. 1591–1666) ซึ่งรู้จักกันทั่วไปในชื่อเล่นของเขาว่า เกอร์ซิโน สร้างขึ้นเพื่อเติมเต็มนิทรรศการ 500 ปีแห่งการวาดเขียนระดับปรมาจารย์ชาวอิตาลี.

นิวเจอร์ซีย์เป็นไม่ใช่ไซต์ นำเสนอนิวเจอร์ซีย์เป็นสถานที่และตัวเร่งปฏิกิริยาสำหรับการค้นพบครั้งสำคัญในแนวเพลงป๊อป แนวความคิด การแสดง ที่ดิน และศิลปะสีดำระหว่างปี 1950 และ 1975 เว็บไซต์นี้สำรวจผลงานของศิลปินที่มีนวัตกรรมมากที่สุดในยุคนั้นซึ่งผลิตขึ้นในรัฐ อุปกรณ์ต่อพ่วงระยะไกลมากขึ้น

การคัดเลือกนักแสดง New Jersey: The George Segal Papers ตรวจสอบความซับซ้อนของการปฏิวัติสมัยใหม่ในงานศิลปะและวรรณคดีด้วยการเลือกภาพพิมพ์ ภาพวาด ภาพถ่าย หนังสือหายาก และวารสารจากคอลเล็กชันของพิพิธภัณฑ์ศิลปะมหาวิทยาลัยพรินซ์ตันและห้องสมุดมหาวิทยาลัยพรินซ์ตัน

พ.ศ. 2456 ปีแห่งความทันสมัย ตรวจสอบความซับซ้อนของการปฏิวัติสมัยใหม่ในงานศิลปะและวรรณคดีด้วยการเลือกภาพพิมพ์ ภาพวาด ภาพถ่าย หนังสือหายาก และวารสารจากคอลเล็กชันของพิพิธภัณฑ์ศิลปะมหาวิทยาลัยพรินซ์ตันและห้องสมุดมหาวิทยาลัยพรินซ์ตัน

พรินซ์ตันและการฟื้นฟูกอธิค เป็นการสำรวจมัลติมีเดียของสถาปัตยกรรมฟื้นฟูกอธิคของพรินซ์ตัน—ภาษาภาพที่กำหนดของวิทยาเขต—ผ่านข้อความ เสียง และรูปภาพ สามารถเข้าถึงได้ผ่านทางสมาร์ทโฟนและคอมพิวเตอร์

คอลเลกชันศิลปะเอเชีย นำเสนอผลงานศิลปะเอเชียมากกว่าหกพันชิ้นจากคอลเลกชั่นของพิพิธภัณฑ์

จับภาพอีกครั้ง จากการวิเคราะห์ด้วยเอ็กซเรย์ จะติดตามขั้นตอนของศิลปินชาวอิตาลี Andrea di Bartolo ขณะที่เขาสร้างแท่นบูชา Madonna and Child (ค.ศ. 1410-15)

ย้อนรอยอดีตของจีน: ศิลปะ โบราณคดี และสถาปัตยกรรมของ "ศาลเจ้าตระกูลหวู่" โมเดลเชิงโต้ตอบของศาลเจ้า Wu Family ซึ่งสร้างขึ้นโดยใช้ซอฟต์แวร์สร้างแบบจำลอง 3 มิติและการอ่าน GPS ช่วยให้คุณสำรวจรากฐานของยุควัฒนธรรมที่ร่ำรวยที่สุดยุคหนึ่งของจีนในสมัยโบราณ หากต้องการเข้าถึงลิงก์ที่เกี่ยวข้องจากนิทรรศการ Recarving China's Past: Art, Archaeology and Architecture of the Wu Family Shrine ซึ่งเปิดให้เข้าชมตั้งแต่วันที่ 5 มีนาคม 2548 ถึง 26 มิถุนายน 2548 โปรดคลิกที่นี่

พ่อมดแห่งสวรรค์ชั้นที่ห้า สำรวจเทพเจ้าเซรามิก Nahua (ชาวเม็กซิกันตอนกลาง) ซึ่งเป็นภาชนะสำหรับเผาเครื่องหอม ให้ข้อมูลเชิงลึกเกี่ยวกับศิลปะเม็กซิกันโบราณและการปฏิบัติพิธีกรรม

เพลงจากดินแดนแห่งเสือจากัวร์ สำรวจเครื่องดนตรีจากวัฒนธรรมอเมริกันโบราณที่รุ่งเรืองตั้งแต่ 1,000 ปีก่อนคริสตกาล จนถึงจุดเริ่มต้นของการพิชิตสเปนในปี ค.ศ. 1519 และช่วยให้คุณเชื่อมโยงระหว่างการแสดงดนตรีและพิธีกรรม

Félix Candela: วิศวกร ผู้สร้าง ศิลปินโครงสร้าง วาดภาพอาคารคอนกรีตของ Candela เป็นงานศิลปะโครงสร้าง

ศิลปะแห่งการออกแบบโครงสร้าง: มรดกของชาวสวิส นำวิศวกรชาวสวิสทั้ง 6 คนที่ก่อตั้งกลุ่มศิลปินโครงสร้างที่น่าประทับใจที่สุดในศตวรรษที่ 20: Robert Maillart, Othmar H. Ammann, Heinz Isler และ Christian Menn มารวมกัน


ศาลเจ้าหวู่เหลียง - มุมมอง 3 มิติ - ประวัติศาสตร์

ประวัติศาสตร์และโบราณคดีของจีนตอนต้น

บรรณานุกรมของแหล่งโบราณคดีที่เลือก

เหยาซาน 瑤山 สุสาน
เหยาซาน 瑤山 , Yuhang 余杭 , เจ้อเจียง
(ขุด 2530)

เจ้อเจียง เซิง เหวินหวู่ เกากู หยานจิ่วซั่ว 浙江省文物考古硏究所 เหยาซาน 瑤山 . ปักกิ่ง: เหวินหวู่, 2003.

  1. ช้าง, กวางจิ. "จีนในยุคก่อนประวัติศาสตร์" in ประวัติศาสตร์เคมบริดจ์ของจีนโบราณ, 37-73 (เฉพาะ 60-66).
  2. James, Jean M. "Images of Power: หน้ากากแห่งวัฒนธรรม Liangzhu" ปฐมนิเทศ 22.6 (1991): 46–55. DS 501 O73 FAL

เออร์ลิโถ 二里頭เว็บไซต์
เอ๋อหลี่โถว 二里頭 ,หยานซี 偃師 , เหอหนาน
(ขุดลอก พ.ศ. 2502-ปัจจุบัน)

Zhongguo shehui kexue หยวน kaogu yanjiusuo 中國社會科學院考古硏究所 Yanshi Erlitou: 1959 nian-1978 nian kaogu fajue baogao 偃師二 里 頭 : 1959 年 -1978 年考古發掘報告 . ปักกิ่ง: Zhongguo dabaike quanshu, 1999

  1. แบ็กลีย์, โรเบิร์ต. "โบราณคดีซาง" ใน ประวัติศาสตร์เคมบริดจ์ของจีนโบราณ, 124-231 (โดยเฉพาะ 158-165).
  2. ช้าง, กวางจิ. โบราณคดีจีนโบราณ. New Haven: สำนักพิมพ์มหาวิทยาลัยเยล, 1986 (โดยเฉพาะ 307-317) บมจ. DS 715 C38
  3. ไชลด์ส-จอห์นสัน, เอลิซาเบธ. "หยกสัญลักษณ์แห่งยุคเอ้อหลี่โถว: ประเพณีราชวงศ์เซี่ย" หอจดหมายเหตุแห่งศิลปะเอเชีย 48 (1995): 64-92. N 7260 A68 FAL.
  4. Fitzgerald-Huber, Louisa G. "Qijia and Erlitou: คำถามเกี่ยวกับการติดต่อกับวัฒนธรรมที่ห่างไกล" ประเทศจีนตอนต้น 20 (1995): 17-67.
  5. Liu, Li 'ผลิตภัณฑ์แห่งจิตใจและมือ': การผลิตสินค้าอันทรงเกียรติในยุคหินใหม่และยุคต้นของจีน มุมมองชาวเอเชีย 42.1 (2003): 1-40. บมจ. ดีเอส 514 เอ78
  6. หลิว, หลี่. "รูปแบบการตั้งถิ่นฐาน ความแปรปรวนของ Chiefdom และการพัฒนารัฐยุคแรกในภาคเหนือของจีน วารสารโบราณคดีมานุษยวิทยา 15 (1996): 237-288. บมจ. ซี 79 E85 J68
  7. Liu, Li, "Special Report : On the Chronology of the Three Dynasties." The Ancient East Asia Website (http://www2.kenyon.edu/Depts/Religion/Fac/Adler/Reln270/SanDaiChronology.htm).
  8. Liu, Li และ Xingcan Chen "เมืองและเมือง: การควบคุมทรัพยากรธรรมชาติในยุคแรก ๆ ประเทศจีน" แถลงการณ์พิพิธภัณฑ์ฟาร์อีสเทิร์น 73 (2544): 5-47. บมจ. ดีเอส 714 เอส7
  9. เชลัค, กิเดโอน. "ความซับซ้อนทางสังคมในภาคเหนือของจีนในช่วงยุคสำริดตอนต้น: การศึกษาเปรียบเทียบวัฒนธรรม Erlitou และ Xiajiadian ตอนล่าง มุมมองชาวเอเชีย 33.2 (1994): 261-292. บมจ. ดีเอส 514 เอ78
  10. Thorp, Robert L. "Erlitou และการค้นหา Xia." ประเทศจีนตอนต้น 16 (1991): 1-38.
  11. เจิ้ง, กวง. “ความสัมพันธ์ระหว่างสิ่งที่เหลืออยู่ที่ Erlitou และสำริดตอนต้น
    อารยธรรมยุคจีน” ใน จุดเริ่มต้นของโลหะวิทยาในประเทศจีน, Katheryn M. Linduff และคณะ, 215-22. ภาษาจีนศึกษา 11. Lewiston, NY: Edwin Mellen, 2000

ฟู่ห่าว 婦好 สุสาน (M5)
Yinxu 殷墟 , Anyang 安陽 , เหอหนาน
(ขุด 2471-ปัจจุบัน)

หลี่ จี 李濟 , ed. อันยาง fajue เป่าเกา . 4 vols.Taibei: Nantian, 1978. DS 793 A577 A572 PCL.

Zhongguo shehui kexue หยวน, kaogu yanjiusuo 中國社會科學院考古研究所. Yinxu de faxian yu yanjiu 殷墟的發現與研究 . ปักกิ่ง: Kexue, 1994 (ไม่ใช่รายงานไซต์ แต่เป็นการสำรวจที่ครอบคลุม)

  1. แบ็กลีย์, โรเบิร์ต. "Shang โบราณคดี." In ประวัติศาสตร์เคมบริดจ์ของจีนโบราณ, 124-231 (โดยเฉพาะ 180-208).
  2. เอบรีย์, แพทริเซีย บัคลีย์. "Shang Tomb of Fuhao." In หนังสือภาพอารยธรรมจีน (เว็บไซต์อินเทอร์เน็ต: http://depts.washington.edu/chinaciv/archae/2fuhmain.htm)
  3. ช้าง, กวางจิ. "สมาคมซางจากอันหยาง" อิน อารยธรรมซาง, 67-135. นิวเฮเวน: สำนักพิมพ์มหาวิทยาลัยเยล, 1980.
  4. ช้าง, เค[วัง-]ฉ[hih], ed. การศึกษาโบราณคดีซาง: เอกสารคัดเลือกจากการประชุมนานาชาติเรื่องอารยธรรมซาง. New Haven and London: สำนักพิมพ์มหาวิทยาลัยเยล, 1986. บมจ. DS 744 I57
  5. ฮาปาเนน, มินนา. "พระราชสวามี Fu Hao of the Shang." In ประเพณีของมนุษย์ในจีนยุคก่อนสมัยใหม่, เอ็ด. เคนเน็ธ เจ. แฮมมอนด์, 1-13. ประเพณีของมนุษย์ทั่วโลก ไม่ใช่ 4. Wilmington, Del.: Scholarly Resources, 2002.
  6. ไชลด์ส-จอห์นสัน, เอลิซาเบธ, เอ็ด. และทีอาร์ "การขุดหลุมฝังศพหมายเลข 5 ที่ Yinxu, Anyang." สังคมวิทยาและมานุษยวิทยาจีน 15.3 (1983). บมจ. HM 1 C45
  7. ฟงเหวินซีเอ็ด ยุคสำริดที่ยิ่งใหญ่ของจีน: นิทรรศการจากสาธารณรัฐประชาชนจีนนิวยอร์ก: พิพิธภัณฑ์ศิลปะเมโทรโพลิแทน, 1980. NK 7983.22 N48 FAL .
  8. หลี่, ชี. อันยาง ซีแอตเทิล: University of Washington Press, 1977. DS 796 A55 L5 PCL.
  9. หลี่, ชี. จุดเริ่มต้นของอารยธรรมจีน: การบรรยายสามบทพร้อมภาพประกอบที่ Anyang Seattle, University of Washington Press, 2500. 913.31 L612B PCL
  10. ลินดัฟฟ์, แคเธอริน. "ชีวิตของผู้หญิงถูกฝังอยู่ในพิธีฝังศพในประเทศจีนโบราณที่ Anyang" In ในการแสวงหาเพศ: แนวทางทางโบราณคดีทั่วโลก เอ็ด Sarah Milledge Nelson และ Myriam Rosen-Ayalon, 257-88. เพศและโบราณคดี Series 1. Walnut Creek, Calif.: Rowman & Littlefield, Altamira, 2002. CC 72.4 I5 PCL.
  11. เซิน, เฉิน. Anyang และ Sanxingdui: เปิดเผยความลึกลับของอารยธรรมจีนโบราณ. โตรอนโต: พิพิธภัณฑ์ Royal Ontario, 2002
  12. ธอร์ป, โรเบิร์ต แอล. ประเทศจีนในยุคสำริดตอนต้น: อารยธรรมซาง. ฟิลาเดลเฟีย : University of Pennsylvania Press, 2006. DS 744.2 T46 2006 PCL.
  13. Thorp, Robert L. "โบราณคดีแห่งสไตล์ที่ Anyang: Tomb 5 ในบริบท" หอจดหมายเหตุแห่งศิลปะเอเชีย 41 (1988): 47-69. N 7260 A68 FAL.
  14. วัง, หญิง. "อันดับและอำนาจในหมู่สุภาพสตรีในศาลที่ Anyang." In เพศและโบราณคดีจีน เอ็ด Katheryn M. Linduff และ Yan Sun, 95-113. เพศและโบราณคดี Series 8. Walnut Creek, Calif.: Rowman & Littlefield, Altamira, 2004

เว่ย 微 การสะสมเชื้อสาย (J1)
จ้วงไป๋ 莊白 , ฟู่เฟิง 扶風 , ชานซี
(ขุดค้น พ.ศ. 2519)

หยิน เซิงผิง 尹盛平 , ed. Xi Zhou Wei shi jiazu qingtongqi qun yanjiu 家族青銅器青銅器群研究 . ปักกิ่ง: เหวินหวู่, 1992.

  1. *Hsu, Cho-Yun และ Katheryn M. Linduff อารยธรรมโจวตะวันตก. New Haven: สำนักพิมพ์มหาวิทยาลัยเยล, 1988 (โดยเฉพาะ 289-302) บมจ. ดีเอส 747 เอช79 .
  2. ฟัลเคนเฮาเซ่น, โลธาร์ ฟอน. "ดนตรีพิธีกรรมในยุคสำริด ประเทศจีน: มุมมองทางโบราณคดี" Ph.D. วิทยานิพนธ์. มหาวิทยาลัยฮาร์วาร์ด, 1988.
  3. รอว์สัน, เจสสิก้า. "โบราณคดีโจวตะวันตก" ใน ประวัติศาสตร์เคมบริดจ์ของจีนโบราณ, 352-449 (โดยเฉพาะ 390-93). บมจ. ดีเอส 741.5 C35..
  4. รอว์สัน, เจสสิก้า. Western Zhou Ritual Bronzes จาก Arthur M. Sackler Collections Washington: มูลนิธิ Arthur M. Sackler Cambridge: Arthur M. Sackler Museum, Harvard University, 1990 (โดยเฉพาะ vol. 1, 19-21) NK 7983.2 R39 FAL.
  5. Shaughnessy, Edward L. "สู่ภูมิศาสตร์สังคมของ Zhouyuan ในช่วงราชวงศ์โจวตะวันตก: เชื้อสาย Jing และ Zhong ของ Fufeng County" In พรมแดนทางการเมือง พรมแดนทางชาติพันธุ์ และภูมิศาสตร์มนุษย์ในประวัติศาสตร์จีน, เอ็ด. Nicola Di Cosmo และ Don J. Wyatt, 16-34. ลอนดอนและนิวยอร์ก : RoutledgeCurzon, 2003. GF 41 P65 PCL.
  6. Shaughnessy, Edward L. "การสะสมโจวตะวันตกและประวัติครอบครัวในโจวหยวน" ใน โบราณคดีจีน: มุมมองใหม่เกี่ยวกับอดีตของจีนในศตวรรษที่ยี่สิบ เอ็ด เซียวเหนิง หยาง, 1: 255-67. นิวเฮเวน: สำนักพิมพ์มหาวิทยาลัยเยล 2547 DS 715 N486 FAL
  7. Shaughnessy, Edward L. "Zhouyuan คำจารึก Oracle-Bone: เข้าสู่ขั้นตอนการวิจัย?" ประเทศจีนตอนต้น 11-12 (1985-1987): 146-194.
  8. * อู๋หง ความยิ่งใหญ่ในศิลปะและสถาปัตยกรรมจีนยุคแรก (สแตนฟอร์ด: สำนักพิมพ์มหาวิทยาลัยสแตนฟอร์ด, 1995), 77-99. N 7343.2 W8 FAL.

หลุมฝังศพของ Marquis Yi แห่ง Zeng (Zeng Hou Yi mu 曾侯乙墓 )
Leigudun 擂鼓墩 , Suixian 隧縣 , หูเป่ย์
(ขุดเมื่อปี 2521)

เซง โหว ยี มู . เอ็ด Hubei sheng bowuguan 湖北省博物館 and Zhongguo shehui kexueyuan, kaogu yanjiusuo 中國社會科學院考古研究所 . 2 ฉบับ ปักกิ่ง: เหวินหวู่, 1989.

  1. ทีมขุดค้นทางโบราณคดี Sui Xian Leigudun "Tomb I. รายงานการขุดโดยย่อของหลุมฝังศพของ Marquis Yi Zeng ที่ Sui Xian, Hubei" trans. โรเบิร์ต แอล. ธอร์ป. จีนศึกษาในโบราณคดี 1.3 (1979-1980) 3-45. บมจ. ดีเอส 715 ซี46
  2. เอบรีย์, แพทริเซีย บัคลีย์. "สุสานโจวตะวันออกของ Marquis Yi." In หนังสือภาพอารยธรรมจีน (เว็บไซต์อินเทอร์เน็ต: http://depts.washington.edu/chinaciv/archae/2marmain.htm )
  3. ฟัลเคนเฮาเซ่น, โลธาร์ ฟอน. "The Zeng Hou Yi ค้นพบในประวัติศาสตร์ดนตรีจีน" In ดนตรีในยุคขงจื๊อ, เอ็ด เจนนี่ เอฟ. โซ, 101-13. วอชิงตัน ดีซี: Smithsonian, 2000. ML 462 W33 A78 FAL
  4. Thorp, Robert L. "สุสาน Sui Xian: ทบทวนศตวรรษที่ห้า" อาร์ทิบัส เอเซีย 43 (1981-82): 67-110. N 8 A75 FAL.
  5. วัง, ซิชู. "เครื่องดนตรีและการเสียสละของมนุษย์ในหลุมฝังศพของ Marquis Yi แห่ง Zeng" โบราณคดีและศิลปะของจีน 3.2/3 (1999) 105-116.

เป่าซาน 包山 สุสาน M2
Baoshan 包山 , Jingmen 荊門 , หูเป่ย์
(ขุดเมื่อ พ.ศ. 2535-2544)

เป่าซาน ชูมู 包山楚墓. เอ็ด. Hubei Sheng Jingsha tielu kaogudui 湖北省荊沙鐵路考古隊. มณฑลหูเป่ย์เซิงจิงซา 2 ฉบับ ปักกิ่ง: เหวินหวู่, 1991.

  1. *คุก, คอนสแตนซ์ เอ. ความตายในประเทศจีนโบราณ: เรื่องราวของการเดินทางของมนุษย์คนเดียว. จีน
    การศึกษา 8. Leiden: Brill, 2006. GT 3283 J53 C66 PCL.
  2. ฮาร์เปอร์, โดนัลด์. "A ปีศาจจีนแห่งศตวรรษที่ 3 ก่อนคริสตกาล" Harvard Journal of Asiatic Studies 45.2 (1985): 459-98. DS 501 H3 PCL และออนไลน์
  3. วังเป่าซวน. "Aอภิปรายเกี่ยวกับวันที่องค์ประกอบของ Guodian Chu . ต่างๆ
    ข้อความสลิปและภูมิหลังของพวกเขาพร้อมการอภิปรายเกี่ยวกับการออกเดทของ Guodian และ
    สุสานเป่าซาน" ความคิดจีนร่วมสมัย 32.1 (2000): 18–42. บมจ. บี 1 ซี55
  4. เวล, ซูซาน. "Chu Law in Action: เอกสารทางกฎหมายจาก Tomb 2 at Baoshan."
    ใน การกำหนด Chu: ภาพและความเป็นจริงในประเทศจีนโบราณ, เอ็ด. คอนสแตนซ์ เอ. คุกและจอห์น เอส. เมเจอร์, 77-97. โฮโนลูลู: University of Hawai'i Press, 1999. DS 741.65 D44 PCL.

Guodian 郭店 Tomb M1 (และพบต้นฉบับที่เกี่ยวข้อง)
Guodian 郭店 , Jingmen 荊門 , หูเป่ย์
(ค้นพบ ค.ศ. 1993)

จิงเหมิน ชิ โบวกวน 荊門市博物館 . "Jingmen Guodian yihao Chumu" 荊門郭สาขา一號楚墓 . เหวินหวู่ 文物 1997.7: 35-48. บมจ. ดีเอส 715 W44

  1. อัลลัน ซาร่าห์ และคริสปิน วิลเลียมส์ สหพันธ์ The Guodian ลาวซี่: Proceedings of the International Conference, Dartmouth College, พฤษภาคม 1998. Early China Special Monograph Series 5. Berkeley: Society for the Study of Early China and Institute of East Asian Studies, University of California, 2000.
  2. Boltz, William G. "ศตวรรษที่สี่ก่อนคริสตกาล ต้นฉบับ Guodiann จาก Chuu และองค์ประกอบของ เลาซี." วารสาร American Oriental Society 119.4 (1999): 590-608. บมจ. พีเจ 2 เอ6
  3. Boltz, วิลเลียม จี "ลี่จี้ 'Tzy i' และ Guodiann Manuscript Matches." Und folge nun dem, was mein Herz begehrt: Festschrift สำหรับ Ulrich Unger zum 70. Geburtstag. เอ็ด. ไรน์ฮาร์ด เอ็มเมอริช et al. Hamburger Sinologische Schriften 8. ฮัมบูร์ก, 2002. I, 209-21.
  4. Boltz, William G. "Manuscripts with Transmission Counterparts." In แหล่งใหม่ของประวัติศาสตร์จีนยุคแรก: บทนำสู่การอ่านจารึกและต้นฉบับ, ed., Edward L. Shaughnessy, 253-83. Berkeley: Society for the Study of Early China and the Institute of East Asian Studies, University of California, Berkeley, 1997.
  5. บัมบาเคอร์, สเตฟาน ปีเตอร์. "ต้นฉบับที่เก่าแก่ที่สุดของ เหลาซี ค้นพบจนถึงปัจจุบัน" Asiatische Studien/Etudes Asiatiques 52.4 (1998): 1175-85. บมจ. ดีเอส 1 เอ54
  6. คุก, สก็อตต์. "ศิลปะที่สมบูรณ์และความมีคุณธรรม: The 'Wu xing' 五行 Essay and its Aesthetic." วรรณคดีจีน: บทความ บทความ บทวิจารณ์ 22 (2000): 113-46 PL 2250 C533 PCL.
  7. คุก, สก็อตต์. "การอภิปรายเรื่องการปกครองแบบบีบบังคับและ 'วิถีของมนุษย์' ในแง่ของตำรารัฐสงครามที่เพิ่งขุดขึ้นมา" Harvard Journal of Asiatic Studies 64.2 (2004): 399-440. DS 501 H3 PCL และออนไลน์
  8. คุก, สก็อตต์. การตรวจสอบของ The Guodian ลาวซี่: การประชุมนานาชาติ, Dartmouth College, พฤษภาคม 1998, เอ็ด ซาร่าห์ อัลลัน และคริสปิน วิลเลียมส์ China Review International 9.1 (2545): 53-65. กอง DS 706 C51115 PCL.
  9. ฟัลเคนเฮาเซ่น, โลธาร์ ฟอน. "การจัดอันดับทางสังคมใน Chu Tombs: เบื้องหลังการฝังศพของต้นฉบับรัฐที่ต่อสู้ดิ้นรนค้นหา" โมนูเมนตา เซริก้า 51 (2546): 439-526. บมจ. ดีเอส 701 เอ็ม6
  10. จิเอเล่, เอนโน. "ต้นฉบับภาษาจีนตอนต้น: รวมภาคผนวกและคอร์ริเจนดาถึง แหล่งใหม่ของประวัติศาสตร์จีนยุคแรก: บทนำสู่การอ่านจารึกและต้นฉบับ." ประเทศจีนตอนต้น 23-24 (2541-2542): 247-337 บมจ. ดีเอส 701 E17
  11. จิเอเล่, เอนโน. "การใช้ต้นฉบับภาษาจีนตอนต้นเป็นแหล่งข้อมูลทางประวัติศาสตร์" โมนูเมนตา เซริก้า 51 (2546): 409-438. บมจ. ดีเอส 701 เอ็ม6
  12. ฮาร์เปอร์, โดนัลด์. "แนวคิดเรื่องความเจ็บป่วยในการแพทย์แผนจีนยุคแรกตามที่บันทึกไว้ในศตวรรษที่ 3 และ 2 ที่เพิ่งค้นพบใหม่ ต้นฉบับ." Südhoffs Archiv สำหรับ Geschichte der Medizin und der Naturwissenschaften 74 (1990): 210-35.
  13. *ฮอลโลเวย์, เคนเนธ ดับเบิลยู. Guodian: เมล็ดพันธุ์ใหม่ที่ค้นพบของปรัชญาศาสนาและการเมืองของจีน อ็อกซ์ฟอร์ด: สำนักพิมพ์มหาวิทยาลัยอ็อกซ์ฟอร์ด, 2552. Z 6605 C5 H66 PCL.
  14. อิเคดะ, โทโมฮิสะ. "Symposium I: แง่มุมของวัฒนธรรม Pre-Qin ที่เห็นได้จาก Chu Slips." โคคุไซ โทโฮ กาคุฉะ ไคกิ คิโย 國際東方學者會議紀要 44 (1999): 98-105. บมจ. CB 253 I5
  15. อิเคดะ โทโมฮิสะ et al. "บรรณานุกรมหนังสือและบทความเกี่ยวกับไม้ไผ่ Ch'u จาก Kuo-tien." Acta Asiatica 80 (2001): 72–88. บมจ. ดีเอส 12 เอ45
  16. หลิว, เซียวกัน. "จากใบไผ่สู่เวอร์ชันที่ได้รับ: คุณสมบัติทั่วไปในการเปลี่ยนแปลงของ เหลาซี." Harvard Journal of Asiatic Studies 63.2 (2003): 337-82. DS 501 H3 PCL และออนไลน์
  17. ไพน์ส, ยูริ. "มิตรหรือศัตรู: การเปลี่ยนแนวคิดความสัมพันธ์ระหว่างรัฐมนตรี-รัฐมนตรีและแนวคิดเรื่องความภักดีในจีนยุคก่อนจักรวรรดิ" โมนูเมนตา เซริก้า 50 (2545): 35-74. บมจ. ดีเอส 701 เอ็ม6
  18. ไพน์ส, ยูริ. "การเปลี่ยนแปลงคำศัพท์ในตำรา Zhanguo" วารสาร American Oriental Society 122.4 (2545): 691-705. บมจ. พีเจ 2 เอ6
  19. Szabó, Sándor P. "The Term เสินหมิง—ความหมายในความคิดของจีนโบราณและในต้นฉบับที่เพิ่งค้นพบ" Acta Orientalia 56.2-4 (2003): 251-74. บมจ. พีเจ 1 A4
  20. ทานิกุจิ, มิทสึรุ. "Ch'u Bamboo Slips จากยุครัฐที่ต่อสู้กันและภูมิศาสตร์ประวัติศาสตร์ของรัฐ Ch'u" Acta Asiatica 80 (2001): 27-40. บมจ. ดีเอส 12 เอ45
  21. ซิง, เหวิน. "The Guodian Chu Slips: ประเด็นเกี่ยวกับบรรพชีวินวิทยาและความสำคัญของพวกเขา" ความคิดจีนร่วมสมัย 32.1 (2000): 7–17. บมจ. บี 1 ซี55
  22. ยี, ซัง-รยอล. "ทัศนะของรัฐมนตรีผู้ภักดีในหนังสือ Ch'u Bamboo-Slip Lu Mu-kung wen Tzu-ssu จาก ก๊วนเตียน" Acta Asiatica 80 (2001): 52–71. บมจ. ดีเอส 12 เอ45

สุสานจักรพรรดิองค์แรกของฉิน ( 秦始皇帝陵園 )
Lintong 臨潼 , ส่านซี

  1. คอตเตอเรล, อาร์เธอร์. จักรพรรดิองค์แรกของจีน: การค้นพบทางโบราณคดีที่ยิ่งใหญ่ที่สุดในยุคของเรา. นิวยอร์ก: Holt, Rinehart และ Winston, 1981. DS 747.9 C47 C67 PCL
  2. ธอร์ป, โรเบิร์ต. "การบูรณะโบราณสถาน Lishan Necropolis." In ยุคสำริดที่ยิ่งใหญ่ของจีน: การประชุมวิชาการ, เอ็ด จอร์จ คูวายามะ 72-83 ลอสแองเจลิส: พิพิธภัณฑ์ศิลปะลอสแองเจลีสเคาน์ตี้ 2526 NK 7983.22 G73 FAL
  3. ซิม่า เฉียน. "จักรพรรดิองค์แรกของฉิน" In The Grand Scribe's Records, เอ็ด. วิลเลียม เอช. นีนเฮาเซอร์ จูเนียร์ 1: 127-77 Bloomington: Indiana University Press, 1994. DS 741.3 S6813 PCL .
  4. เคสเนอร์, ลาดิสลาฟ. "ความเหมือนไม่มีใคร: (Re) นำเสนอกองทัพของจักรพรรดิองค์แรก กระดานข่าวศิลปะ 77.1 (1995): 115-132. N 11 C4 FAL.

หลุมฝังศพของเลดี้ได 軚 (M1)
Mawangdui 馬王堆 , ฉางซา 長沙 , หูหนาน

Hunan sheng bowuguan 湖南省博物館 และ Zhongguo kexueyuan kaogu yanjiusuo 中國科學院考古研究所 ฉางซา มะวังตุ้ย ยี่ ห่าว ฮัน มู 長沙馬王堆一號墓 . 2 ฉบับ ปักกิ่ง: Wenwu, 1973. บมจ. DS 796 C4 H85

  1. *บัค, เดวิด. "สุสานสามราชวงศ์ฮั่นที่มะวังตุย" โบราณคดีโลก 7.1 (1975): 30–45. 913.05 W893 PCL & ออนไลน์
  2. เชา, ฟอง. "Ma-wang-tui: ขุมสมบัติจากราชวงศ์ฮั่นตะวันตก" อาร์ทิบัส เอเซีย 35.1-2 (1973): 5-24. N 8 A75 FAL.
  3. ไล, กั๋วหลง. "แผนภาพระบบการไว้ทุกข์จากมะวังดุย." ประเทศจีนตอนต้น 28 (2546): 43-99. บมจ. ดีเอส 701 อี17
  4. เฉียน, ห่าว. "สุสานฮั่นที่ Mawangdui ฉางชา: บ้านใต้ดินของครอบครัวชนชั้นสูง" In นอกโลกของจีน: การค้นพบทางโบราณคดีในสาธารณรัฐประชาชนจีน, เอ็ด Qian Hao, Chen Heyi และ Ru Suichu, 87-125. นิวยอร์ก: H. N. Abrams, 1981. DS 715 Q513 PCL.
  5. *อู๋ หง. "Art in a Ritual Context: ทบทวนมะวังดุย." ประเทศจีนตอนต้น 17 (1992): 111-144. ได้จากอาจารย์ผู้สอน

สุสานหลิวเซิง
หม่านเฉิง 滿城 , เหอเป่ย์

Zhongguo shehui kexue yuan kaogu yanjiusuo 中國社會科學院考古研究所 และ Hebei sheng wenwu guanli chu 河北省文物管理處 หม่านเฉิง ฮัน มู ฟาจือ เป่าเกา . 2 ฉบับ ปักกิ่ง: Wenwu, 1980. บมจ. DS 793 M25 M28


สถานที่น่าไปภายในวัด Wuhou

ตัวหลักของวัด Wuhou ประตูหน้า ประตูที่สอง วัด Liu Bei วัด Zhuge Liang และวัด Sanyi ไหลลงใต้ไปทางเหนือ นอกจากนี้ หลุมฝังศพของ Liubei ทางฝั่งตะวันตกของวัด Wuhou ก็ควรค่าแก่การเยี่ยมชม

ความสำเร็จสามเท่า Stele

วัดหลิวเป่ย

เมื่อผ่านประตูที่สอง วัดอันงดงามของ Liubei หรือที่เรียกว่าวัด Zhaolie ยืนอยู่ตรงหน้าคุณ รูปปั้นสีทองของ Liubei ยืนอยู่ตรงกลางภายในวัด และความสูงของรูปปั้นคือ 3 เมตร (9.84 ฟุต) รูปปั้นหลานชายของเขา Liuchen อยู่ทางด้านซ้ายของเขา ทางด้านตะวันออกของลานบ้าน นักท่องเที่ยวสามารถชมประติมากรรมของกวนยู่และลูกหลานของเขา ขณะที่ทางทิศตะวันตกเป็นประติมากรรมของจางเฟยและลูกหลานของเขา Zhangfei และ Guanyu เป็นทั้งแม่ทัพการต่อสู้ที่ยอดเยี่ยมใน Liubei ศิลาเล็กๆ วางอยู่ด้านหน้าของประติมากรรมแต่ละชิ้นเพื่อบอกชื่อและประสบการณ์ชีวิตของฟิกเกอร์

วัด Zhuge Liang

ข้ามวัด Zhaolie และเดินลงไปไม่กี่ก้าว และมองเห็น Temple of Zhuge Liang รูปปั้นของ Zhuge Liang และลูกหลานทั้งสามรุ่นของเขาตั้งอยู่ใจกลางวัด ว่ากันว่ากลองทองสัมฤทธิ์สามใบที่มีลวดลายวิจิตรตระการตาอยู่ด้านหน้ารูปปั้น ถูกสร้างขึ้นเมื่อเขานำกองทัพและเดินทัพไปทางใต้ ดังนั้นกลองทั้งสามจึงถูกตั้งชื่อว่า Zhege Drum เลื่อนสายตาของคุณไปที่หลังคาของวัดซึ่งมีการพิมพ์ประโยคจาก &ldquoAdvice to My Son&rdquo ที่เขียนโดย Zhuge Liang มันอ่านว่า &ldquo บุคคลหนึ่งไม่สามารถแสดงอุดมคติอันสูงส่งได้หากไม่มีการใช้ชีวิตที่เรียบง่าย คนๆ หนึ่งไม่สามารถมีความปรารถนาอันสูงส่งได้หากไม่มีสภาวะจิตใจที่สงบสุข

วัดซานยี่

วัดซานยี่สามารถแบ่งออกเป็นสามส่วน: สวดมนต์ วัด และทางเดิน ประติมากรรมสีสันสดใสของ Liubei, Guanyu และ Zhangfei อยู่ภายในวัด ความสูงของรูปปั้นหลิวอยู่ที่ 2.8 เมตร (9.19 ฟุต) ในขณะที่รูปปั้นของ Guan และ Zhang อยู่ที่ 2.6 เมตร (8.53 ฟุต) ความแตกต่างของความสูงแสดงถึงความสัมพันธ์ระหว่างจักรพรรดิกับเจ้าหน้าที่ นอกจากนี้ยังมี stele สีดำสองกลุ่ม กว้าง 2.2 เมตร (7.22 ฟุต) และสูง 2.3 เมตร (7.54 ฟุต)

หลุมฝังศพของ Liubei (สุสาน Huiling)

หลุมฝังศพของ Liubei สุสาน Huiling ตั้งอยู่ทางฝั่งตะวันตกของวัด Wuhou มีรายงานว่ามีประวัติศาสตร์ยาวนานกว่า 1,700 ปี และได้รับการอนุรักษ์ไว้อย่างดีและไม่เคยถูกทำลายล้างมาจนถึงทุกวันนี้ หลุมฝังศพล้อมรอบด้วยกำแพงอิฐทรงกลม สร้างขึ้นในปี พ.ศ. 2368


การผลิตกระจกอลูมิเนียมอัลลอยด์น้ำหนักเบาด้วยการพิมพ์ 3 มิติและการจำลองแบบ

กระจกอัลลอยด์ AlSi10Mg ผลิตขึ้นโดยใช้วิธีการพิมพ์และการจำลองแบบ 3 มิติ เพื่อให้เกิดการสร้างกระจกน้ำหนักเบาอย่างรวดเร็ว ศึกษาคุณสมบัติทางกล ความร้อน และทางกายภาพ ความแม่นยำของพื้นผิว และความเสถียรของมิติ ด้วยวิธีการหลอมด้วยเลเซอร์แบบเฉพาะเจาะจง กระจกอัลลอยด์ถูกพิมพ์ออกมาและแสดงความหนาแน่นของพื้นที่ต่ำที่ 28.4 กก. / ตร.ม. ด้วยการจำลองแบบ ความแม่นยำของพื้นผิวกระจกได้รับการปรับปรุงเป็น 0.033 λ (ค่าเฉลี่ยรูตสแควร์, λ = 632.8 nm ) ความขรุขระของพื้นผิวเท่ากับ 1.3 นาโนเมตร (Ra) ผลการทดสอบความคงตัวระบุว่ากระจกพิมพ์ 3 มิติมีมิติที่ดีในอากาศเป็นเวลานานและในสภาพแวดล้อมที่เปลี่ยนแปลงอุณหภูมิ

© 2018 Optical Society of America

Yang Bai, Zhiyu Zhang, Donglin Xue และ Xuejun Zhang
แอปพลิเค เลือก. 57(34) F62-F67 (2018)

จีน่า แอล. เฟอร์เรลลี, ฮยอน ไอ. คิม และราฟาเอล เจ. ซัลดิวาร์
แอปพลิเคชัน เลือก. 59(15) 4606-4617 (2020)

Ziqiang Yin และ Zhang Yi
แอปพลิเค เลือก. 54(26) 7835-7841 (2015)

เถาจ้าว, ห่าวหู, เซียวเฉียงเผิง, ชุนหยางตู้, เจ้าเหลียงกวน และเจียห่าวหยง
แอปพลิเค เลือก. 58(22) 6091-6097 (2019)

Dan Xie, Xuefeng Chang, Xiayun Shu, Jian Wang, Lifang Mei และ Shanming Luo
เลือก. ด่วน 24(26) 30264-30274 (2016)

อ้างอิง

คุณไม่มีสิทธิ์สมัครรับข้อมูลวารสารนี้ รายการอ้างอิงพร้อมลิงก์อ้างอิงขาออกมีให้สำหรับสมาชิกเท่านั้น คุณสามารถสมัครเป็นสมาชิก OSA หรือในฐานะผู้ใช้ที่ได้รับอนุญาตของสถาบันของคุณ

ติดต่อบรรณารักษ์หรือผู้ดูแลระบบของคุณ
หรือ
เข้าสู่ระบบเพื่อเข้าถึงการสมัครสมาชิก OSA

อ้างโดย

คุณไม่มีสิทธิ์สมัครรับข้อมูลวารสารนี้ ลิงก์ที่อ้างถึงมีให้สำหรับสมาชิกเท่านั้น คุณสามารถสมัครเป็นสมาชิก OSA หรือในฐานะผู้ใช้ที่ได้รับอนุญาตของสถาบันของคุณ

ติดต่อบรรณารักษ์หรือผู้ดูแลระบบของคุณ
หรือ
เข้าสู่ระบบเพื่อเข้าถึงการสมัครสมาชิก OSA

ตัวเลข (10)

คุณไม่มีสิทธิ์สมัครรับข้อมูลวารสารนี้ ไฟล์รูปมีให้สำหรับสมาชิกเท่านั้น คุณสามารถสมัครเป็นสมาชิก OSA หรือในฐานะผู้ใช้ที่ได้รับอนุญาตของสถาบันของคุณ

ติดต่อบรรณารักษ์หรือผู้ดูแลระบบของคุณ
หรือ
เข้าสู่ระบบเพื่อเข้าถึงการสมัครสมาชิก OSA

โต๊ะ (1)

คุณไม่มีสิทธิ์สมัครรับข้อมูลวารสารนี้ ตารางบทความมีให้สำหรับสมาชิกเท่านั้น คุณสามารถสมัครเป็นสมาชิก OSA หรือในฐานะผู้ใช้ที่ได้รับอนุญาตของสถาบันของคุณ

ติดต่อบรรณารักษ์หรือผู้ดูแลระบบของคุณ
หรือ
เข้าสู่ระบบเพื่อเข้าถึงการสมัครสมาชิก OSA

ตัวชี้วัด

คุณไม่มีสิทธิ์สมัครรับข้อมูลวารสารนี้ เมตริกระดับบทความมีให้สำหรับสมาชิกเท่านั้น คุณสามารถสมัครเป็นสมาชิก OSA หรือในฐานะผู้ใช้ที่ได้รับอนุญาตของสถาบันของคุณ

ติดต่อบรรณารักษ์หรือผู้ดูแลระบบของคุณ
หรือ
เข้าสู่ระบบเพื่อเข้าถึงการสมัครสมาชิก OSA


Canonical Wnt inhibitors ปรับปรุง cystogenesis ใน ortholog เมาส์ของมนุษย์ ADPKD

1 ศูนย์ PKD ของมณฑลอานฮุย สถาบันและภาควิชาระบบทางเดินปัสสาวะ โรงพยาบาลในเครือแห่งแรกของมหาวิทยาลัยการแพทย์อานฮุย เหอเฟย มณฑลอานฮุย ประเทศจีน

2 ภาควิชาเภสัชวิทยา Yale University School of Medicine เมืองนิวเฮเวน รัฐคอนเนตทิคัต สหรัฐอเมริกา

3 State Key Laboratory of Molecular Oncology, Cancer Hospital and Institute, Chinese Academy of Medical Sciences and Peking Union Medical College, ปักกิ่ง, จีน

ติดต่อกับ Dianqing Wu, Department of Pharmacology, Yale University School of Medicine, New Haven, Connecticut 06520, USA โทรศัพท์: 203.785.3149 อีเมล: [email protected] หรือไปที่: Guanqing Wu หรือ Chaozhao Liang, Anhui Province PKD Center, Institute/Department of Urology, The First Affiliated Hospital of Anhui Medical University, Hefei, Anhui Province, 230022, China โทรศัพท์: 86.551.62923865 อีเมล: [email protected] (G. Wu) โทรศัพท์: 86.551.62923856 อีเมล: [email protected] (C. Liang)

1 ศูนย์ PKD ของมณฑลอานฮุย สถาบันและภาควิชาระบบทางเดินปัสสาวะ โรงพยาบาลในเครือแห่งแรกของมหาวิทยาลัยการแพทย์อานฮุย เหอเฟย มณฑลอานฮุย ประเทศจีน

2 ภาควิชาเภสัชวิทยา Yale University School of Medicine เมืองนิวเฮเวน รัฐคอนเนตทิคัต สหรัฐอเมริกา

3 State Key Laboratory of Molecular Oncology, Cancer Hospital and Institute, Chinese Academy of Medical Sciences and Peking Union Medical College, ปักกิ่ง, จีน

ติดต่อกับ Dianqing Wu, Department of Pharmacology, Yale University School of Medicine, New Haven, Connecticut 06520, USA โทรศัพท์: 203.785.3149 อีเมล: [email protected] หรือไปที่: Guanqing Wu หรือ Chaozhao Liang, Anhui Province PKD Center, Institute/Department of Urology, The First Affiliated Hospital of Anhui Medical University, Hefei, Anhui Province, 230022, China โทรศัพท์: 86.551.62923865 อีเมล: [email protected] (G. Wu) โทรศัพท์: 86.551.62923856 อีเมล: [email protected] (C. Liang)

1 ศูนย์ PKD ของมณฑลอานฮุย สถาบันและภาควิชาระบบทางเดินปัสสาวะ โรงพยาบาลในเครือแห่งแรกของมหาวิทยาลัยการแพทย์อานฮุย เหอเฟย มณฑลอานฮุย ประเทศจีน

2 ภาควิชาเภสัชวิทยา Yale University School of Medicine เมืองนิวเฮเวน รัฐคอนเนตทิคัต สหรัฐอเมริกา

3 State Key Laboratory of Molecular Oncology, Cancer Hospital and Institute, Chinese Academy of Medical Sciences and Peking Union Medical College, ปักกิ่ง, จีน

ติดต่อกับ Dianqing Wu, Department of Pharmacology, Yale University School of Medicine, New Haven, Connecticut 06520, USA โทรศัพท์: 203.785.3149 อีเมล: [email protected] หรือไปที่: Guanqing Wu หรือ Chaozhao Liang, Anhui Province PKD Center, Institute/Department of Urology, The First Affiliated Hospital of Anhui Medical University, Hefei, Anhui Province, 230022, China โทรศัพท์: 86.551.62923865 อีเมล: [email protected] (G. Wu) โทรศัพท์: 86.551.62923856 อีเมล: [email protected] (C. Liang)

1 ศูนย์ PKD ของมณฑลอานฮุย สถาบันและภาควิชาระบบทางเดินปัสสาวะ โรงพยาบาลในเครือแห่งแรกของมหาวิทยาลัยการแพทย์อานฮุย เหอเฟย มณฑลอานฮุย ประเทศจีน

2 ภาควิชาเภสัชวิทยา Yale University School of Medicine เมืองนิวเฮเวน รัฐคอนเนตทิคัต สหรัฐอเมริกา

3 State Key Laboratory of Molecular Oncology, Cancer Hospital and Institute, Chinese Academy of Medical Sciences and Peking Union Medical College, ปักกิ่ง, จีน

ติดต่อกับ Dianqing Wu, Department of Pharmacology, Yale University School of Medicine, New Haven, Connecticut 06520, USA โทรศัพท์: 203.785.3149 อีเมล: [email protected] หรือไปที่: Guanqing Wu หรือ Chaozhao Liang, Anhui Province PKD Center, Institute/Department of Urology, The First Affiliated Hospital of Anhui Medical University, Hefei, Anhui Province, 230022, China โทรศัพท์: 86.551.62923865 อีเมล: [email protected] (G. Wu) โทรศัพท์: 86.551.62923856 อีเมล: [email protected] (C. Liang)

1 ศูนย์ PKD ของมณฑลอานฮุย สถาบันและภาควิชาระบบทางเดินปัสสาวะ โรงพยาบาลในเครือแห่งแรกของมหาวิทยาลัยการแพทย์อานฮุย เหอเฟย มณฑลอานฮุย ประเทศจีน

2 ภาควิชาเภสัชวิทยา Yale University School of Medicine เมืองนิวเฮเวน รัฐคอนเนตทิคัต สหรัฐอเมริกา

3 State Key Laboratory of Molecular Oncology, Cancer Hospital and Institute, Chinese Academy of Medical Sciences and Peking Union Medical College, ปักกิ่ง, จีน

ติดต่อกับ Dianqing Wu, Department of Pharmacology, Yale University School of Medicine, New Haven, Connecticut 06520, USA โทรศัพท์: 203.785.3149 อีเมล: [email protected] หรือไปที่: Guanqing Wu หรือ Chaozhao Liang, Anhui Province PKD Center, Institute/Department of Urology, The First Affiliated Hospital of Anhui Medical University, Hefei, Anhui Province, 230022, China โทรศัพท์: 86.551.62923865 อีเมล: [email protected] (G. Wu) โทรศัพท์: 86.551.62923856 อีเมล: [email protected] (C. Liang)

1 ศูนย์ PKD ของมณฑลอานฮุย สถาบันและภาควิชาระบบทางเดินปัสสาวะ โรงพยาบาลในเครือแห่งแรกของมหาวิทยาลัยการแพทย์อานฮุย เหอเฟย มณฑลอานฮุย ประเทศจีน

2 ภาควิชาเภสัชวิทยา Yale University School of Medicine เมืองนิวเฮเวน รัฐคอนเนตทิคัต สหรัฐอเมริกา

3 State Key Laboratory of Molecular Oncology, Cancer Hospital and Institute, Chinese Academy of Medical Sciences and Peking Union Medical College, ปักกิ่ง, จีน

ติดต่อกับ Dianqing Wu, Department of Pharmacology, Yale University School of Medicine, New Haven, Connecticut 06520, USA โทรศัพท์: 203.785.3149 อีเมล: [email protected] หรือไปที่: Guanqing Wu หรือ Chaozhao Liang, Anhui Province PKD Center, Institute/Department of Urology, The First Affiliated Hospital of Anhui Medical University, Hefei, Anhui Province, 230022, China โทรศัพท์: 86.551.62923865 อีเมล: [email protected] (G. Wu) โทรศัพท์: 86.551.62923856 อีเมล: [email protected] (C. Liang)

1 ศูนย์ PKD ของมณฑลอานฮุย สถาบันและภาควิชาระบบทางเดินปัสสาวะ โรงพยาบาลในเครือแห่งแรกของมหาวิทยาลัยการแพทย์อานฮุย เหอเฟย มณฑลอานฮุย ประเทศจีน

2 ภาควิชาเภสัชวิทยา Yale University School of Medicine เมืองนิวเฮเวน รัฐคอนเนตทิคัต สหรัฐอเมริกา

3 State Key Laboratory of Molecular Oncology, Cancer Hospital and Institute, Chinese Academy of Medical Sciences and Peking Union Medical College, ปักกิ่ง, จีน

ติดต่อกับ Dianqing Wu, Department of Pharmacology, Yale University School of Medicine, New Haven, Connecticut 06520, USA โทรศัพท์: 203.785.3149 อีเมล: [email protected] หรือไปที่: Guanqing Wu หรือ Chaozhao Liang, Anhui Province PKD Center, Institute/Department of Urology, The First Affiliated Hospital of Anhui Medical University, Hefei, Anhui Province, 230022, China โทรศัพท์: 86.551.62923865 อีเมล: [email protected] (G. Wu) โทรศัพท์: 86.551.62923856 อีเมล: [email protected] (C. Liang)

1 ศูนย์ PKD ของมณฑลอานฮุย สถาบันและภาควิชาระบบทางเดินปัสสาวะ โรงพยาบาลในเครือแห่งแรกของมหาวิทยาลัยการแพทย์อานฮุย เหอเฟย มณฑลอานฮุย ประเทศจีน

2 ภาควิชาเภสัชวิทยา Yale University School of Medicine เมืองนิวเฮเวน รัฐคอนเนตทิคัต สหรัฐอเมริกา

3 State Key Laboratory of Molecular Oncology, Cancer Hospital and Institute, Chinese Academy of Medical Sciences and Peking Union Medical College, ปักกิ่ง, จีน

ติดต่อกับ Dianqing Wu, Department of Pharmacology, Yale University School of Medicine, New Haven, Connecticut 06520, USA โทรศัพท์: 203.785.3149 อีเมล: [email protected]หรือไปที่: Guanqing Wu หรือ Chaozhao Liang, Anhui Province PKD Center, Institute/Department of Urology, The First Affiliated Hospital of Anhui Medical University, Hefei, Anhui Province, 230022, China โทรศัพท์: 86.551.62923865 อีเมล: [email protected] (G. Wu) โทรศัพท์: 86.551.62923856 อีเมล: [email protected] (C. Liang)

1 ศูนย์ PKD ของมณฑลอานฮุย สถาบันและภาควิชาระบบทางเดินปัสสาวะ โรงพยาบาลในเครือแห่งแรกของมหาวิทยาลัยการแพทย์อานฮุย เหอเฟย มณฑลอานฮุย ประเทศจีน

2 ภาควิชาเภสัชวิทยา Yale University School of Medicine เมืองนิวเฮเวน รัฐคอนเนตทิคัต สหรัฐอเมริกา

3 State Key Laboratory of Molecular Oncology, Cancer Hospital and Institute, Chinese Academy of Medical Sciences and Peking Union Medical College, ปักกิ่ง, จีน

ติดต่อกับ Dianqing Wu, Department of Pharmacology, Yale University School of Medicine, New Haven, Connecticut 06520, USA โทรศัพท์: 203.785.3149 อีเมล: [email protected] หรือไปที่: Guanqing Wu หรือ Chaozhao Liang, Anhui Province PKD Center, Institute/Department of Urology, The First Affiliated Hospital of Anhui Medical University, Hefei, Anhui Province, 230022, China โทรศัพท์: 86.551.62923865 อีเมล: [email protected] (G. Wu) โทรศัพท์: 86.551.62923856 อีเมล: [email protected] (C. Liang)

1 ศูนย์ PKD ของมณฑลอานฮุย สถาบันและภาควิชาระบบทางเดินปัสสาวะ โรงพยาบาลในเครือแห่งแรกของมหาวิทยาลัยการแพทย์อานฮุย เหอเฟย มณฑลอานฮุย ประเทศจีน

2 ภาควิชาเภสัชวิทยา Yale University School of Medicine เมืองนิวเฮเวน รัฐคอนเนตทิคัต สหรัฐอเมริกา

3 State Key Laboratory of Molecular Oncology, Cancer Hospital and Institute, Chinese Academy of Medical Sciences and Peking Union Medical College, ปักกิ่ง, จีน

ติดต่อกับ Dianqing Wu, Department of Pharmacology, Yale University School of Medicine, New Haven, Connecticut 06520, USA โทรศัพท์: 203.785.3149 อีเมล: [email protected] หรือไปที่: Guanqing Wu หรือ Chaozhao Liang, Anhui Province PKD Center, Institute/Department of Urology, The First Affiliated Hospital of Anhui Medical University, Hefei, Anhui Province, 230022, China โทรศัพท์: 86.551.62923865 อีเมล: [email protected] (G. Wu) โทรศัพท์: 86.551.62923856 อีเมล: [email protected] (C. Liang)

1 ศูนย์ PKD ของมณฑลอานฮุย สถาบันและภาควิชาระบบทางเดินปัสสาวะ โรงพยาบาลในเครือแห่งแรกของมหาวิทยาลัยการแพทย์อานฮุย เหอเฟย มณฑลอานฮุย ประเทศจีน

2 ภาควิชาเภสัชวิทยา Yale University School of Medicine เมืองนิวเฮเวน รัฐคอนเนตทิคัต สหรัฐอเมริกา

3 State Key Laboratory of Molecular Oncology, Cancer Hospital and Institute, Chinese Academy of Medical Sciences and Peking Union Medical College, ปักกิ่ง, จีน

ติดต่อกับ Dianqing Wu, Department of Pharmacology, Yale University School of Medicine, New Haven, Connecticut 06520, USA โทรศัพท์: 203.785.3149 อีเมล: [email protected] หรือไปที่: Guanqing Wu หรือ Chaozhao Liang, Anhui Province PKD Center, Institute/Department of Urology, The First Affiliated Hospital of Anhui Medical University, Hefei, Anhui Province, 230022, China โทรศัพท์: 86.551.62923865 อีเมล: [email protected] (G. Wu) โทรศัพท์: 86.551.62923856 อีเมล: [email protected] (C. Liang)

1 ศูนย์ PKD ของมณฑลอานฮุย สถาบันและภาควิชาระบบทางเดินปัสสาวะ โรงพยาบาลในเครือแห่งแรกของมหาวิทยาลัยการแพทย์อานฮุย เหอเฟย มณฑลอานฮุย ประเทศจีน

2 ภาควิชาเภสัชวิทยา Yale University School of Medicine เมืองนิวเฮเวน รัฐคอนเนตทิคัต สหรัฐอเมริกา

3 State Key Laboratory of Molecular Oncology, Cancer Hospital and Institute, Chinese Academy of Medical Sciences and Peking Union Medical College, ปักกิ่ง, จีน

ติดต่อกับ Dianqing Wu, Department of Pharmacology, Yale University School of Medicine, New Haven, Connecticut 06520, USA โทรศัพท์: 203.785.3149 อีเมล: [email protected] หรือไปที่: Guanqing Wu หรือ Chaozhao Liang, Anhui Province PKD Center, Institute/Department of Urology, The First Affiliated Hospital of Anhui Medical University, Hefei, Anhui Province, 230022, China โทรศัพท์: 86.551.62923865 อีเมล: [email protected] (G. Wu) โทรศัพท์: 86.551.62923856 อีเมล: [email protected] (C. Liang)

โรคไต polycystic ที่โดดเด่น autosomal (ADPKD) อาจเกิดจากการกลายพันธุ์ใน PKD1 หรือ PKD2 ยีน NS PKD1 ผลิตภัณฑ์ยีนคือตัวรับเซลล์ผิว Wnt ก่อนหน้านี้เราแสดงให้เห็นว่าการขาด PKD2 ผลิตภัณฑ์ยีน PC2 เพิ่มการส่งสัญญาณ β-catenin ในไฟโบรบลาสต์ของตัวอ่อนของเมาส์ เยื่อบุผิวของไตในไต และเซลล์ท่อเก็บไตที่แยกได้ อย่างไรก็ตาม ยังไม่ชัดเจนว่าการส่งสัญญาณ β-catenin มีบทบาทในฟีโนไทป์ของโรคไต polycystic หรือถ้าตัวยับยั้ง Wnt สามารถหยุดการสร้างซีสต์ในแบบจำลองโรค ADPKD ได้หรือไม่ ที่นี่โดยใช้วิธีการทางพันธุกรรมและเภสัชวิทยา เราแสดงให้เห็นว่าการส่งสัญญาณ β-catenin ที่เพิ่มขึ้นซึ่งเกิดจากการขาด PC2 มีส่วนสำคัญต่อฟีโนไทป์ของโรคใน ortholog เมาส์ของ ADPKD ของมนุษย์ เภสัชวิทยายับยั้งความคงตัวของ β-catenin หรือการผลิตโปรตีน Wnt ที่โตเต็มที่ หรือการลดการแสดงออกของยีน Ctnnb1 (ซึ่งเข้ารหัส β-catenin) ยับยั้งการก่อตัวของซีสต์ในไต ปรับปรุงการทำงานของไต และยืดอายุการรอดชีวิตในหนู ADPKD การศึกษาของเราแสดงให้เห็นอย่างชัดเจนถึงความสำคัญของการส่งสัญญาณ β-catenin ในฟีโนไทป์ของโรคที่เกี่ยวข้องกับ Pkd2 การกลายพันธุ์ นอกจากนี้ยังอธิบายถึงผลกระทบของสารยับยั้ง Wnt สองตัว XAV939 และ LGK974 ต่อเป้าหมายการส่งสัญญาณ Wnt ต่างๆ ว่าเป็นวิธีการรักษาที่เป็นไปได้สำหรับ ADPKD ซึ่งปัจจุบันยังไม่มีการรักษาที่มีประสิทธิภาพ

โรคไต polycystic ที่โดดเด่นใน autosomal (ADPKD) เป็นกลุ่มของโรคไตที่สืบทอดได้บ่อยที่สุดโดยมีการพัฒนาของถุงน้ำที่ก้าวหน้าและอาการภายนอกต่างๆ (1, 2) กระบวนการสร้างซีสโตเจเนซิสในไตของมนุษย์สามารถเข้าไปปกคลุมเนื้อเยื่อของไตได้ตามปกติและนำไปสู่ภาวะไตวาย ซึ่งมักเกิดขึ้นในวัยผู้ใหญ่ตอนกลางถึงปลาย โรคนี้เป็นสาเหตุเดียวที่พบบ่อยที่สุดอันดับสี่ของภาวะไตวายระยะสุดท้ายทั่วโลก (3, 4)

ADPKD เกิดจากการกลายพันธุ์ใน PKD1 หรือ PKD2 ยีนซึ่งเข้ารหัสโปรตีน polycystin-1 (PC1) และ polycystin-2 (PC2) ตามลำดับ ประมาณ 85% ของผู้ป่วย ADPKD มีการกลายพันธุ์ใน PKD1และอีก 15% ที่เหลือมีการกลายพันธุ์ใน PKD2 ( 5 , 6) อาการแสดงภายนอกไตที่พบบ่อยที่สุดของ ADPKD คือการก่อตัวของซีสต์จากท่อน้ำดีในตับ (2, 7) ซีสต์ในตับเกิดขึ้นใน 83% ของผู้ป่วย ADPKD ทั้งหมด และ 94% ของผู้ป่วยที่มีซีสต์ในตับมีอายุมากกว่า 35 ปี (8, 9) ฟีโนไทป์ของ ADPKD อื่น ๆ ได้แก่ ถุงน้ำในตับอ่อน (10, 11) หลอดเลือดโป่งพอง (12 – 15) และความผิดปกติของรากเอออร์ตา / ทรวงอก (16 – 18)

มีความคืบหน้าอย่างมากในการอธิบายกลไกระดับโมเลกุลและการเกิดโรคของ ADPKD (3, 5, 19) การศึกษาล่าสุดแสดงให้เห็นว่าโรคเรื้อรังของมนุษย์อาจเกี่ยวข้องกับการส่งสัญญาณ Wnt (20 – 22) การส่งสัญญาณเป็นวิถีทางโมเลกุลที่ได้รับการอนุรักษ์ไว้อย่างสูง ซึ่งควบคุมชะตากรรมของเซลล์และการสร้างตัวอ่อน/การสร้างอวัยวะ และสภาวะสมดุลในสัตว์มีกระดูกสันหลัง การส่งสัญญาณ Wnt ภายในเซลล์สามารถจำแนกได้เป็นวิถีตามบัญญัติและไม่ใช่แบบบัญญัติ มีการเสนอเส้นทางการส่งสัญญาณ Wnt ทั้งสองทางเพื่อให้มีความเชื่อมโยงกับความก้าวหน้าของ ADPKD ในแบบจำลองสัตว์และผู้ป่วยในมนุษย์ (20, 21, 23 – 25) ก่อนหน้านี้ รายงานจำนวนมากได้แสดงให้เห็นว่าโรคซิสติกในไตอาจเป็นผลมาจากการไม่เป็นระเบียบของวิถีทาง Wnt ที่ไม่ใช่แบบบัญญัติ โดยขัดขวางการส่งสัญญาณ Wnt/Ca 2+ และ/หรือกระบวนการ PCP ในเซลล์เยื่อบุผิวของไต (23, 26 – 32) บทบาทของการส่งสัญญาณ Wnt แบบบัญญัติในการเกิดโรคของ ADPKD ยังคงถูกกำหนดไว้อย่างชัดเจน เมาส์แปลงพันธุ์สำหรับ β-catenin ซึ่งเป็นปัจจัยสำคัญสำหรับการส่งสัญญาณ Wnt ที่เป็นที่ยอมรับ แสดงฟีโนไทป์ PKD ที่รุนแรงซึ่งบ่งชี้ว่าการควบคุม β-catenin เพียงอย่างเดียวก็เพียงพอที่จะกระตุ้นการสร้างซีสต์ในไต (33) รบกวนของ Apcซึ่งเป็นปัจจัยร่วมสำหรับคอมเพล็กซ์การย่อยสลาย β-catenin และการแสดงออกของ .มากเกินไป c-Mycซึ่งเป็นผลิตภัณฑ์ที่กำหนดเป้าหมายตามรูปแบบบัญญัติ Wnt ยังกระตุ้นให้เกิด cystogenesis ในไตของเมาส์รุ่นต่างๆ (34, 35) นอกจากนี้ ตรวจพบการเปิดใช้งานอย่างผิดปกติของการส่งสัญญาณ Wnt แบบบัญญัติในสเปกตรัมของเซลล์และเนื้อเยื่อที่ขาด PC1 และ PC2 (29 , 30 , 36 – 38 ) การค้นพบนี้โดยตรงหรือโดยอ้อมสนับสนุนว่าการกระตุ้นมากเกินไปของสัญญาณ Wnt ที่เป็นที่ยอมรับอาจทำให้เกิดซีสต์ในไตของสัตว์จำลอง อย่างไรก็ตาม รายงานอื่นๆ ระบุว่าการส่งสัญญาณ Wnt แบบบัญญัติที่เพิ่มขึ้นอาจไม่มีบทบาทสำคัญในการสร้างถุงน้ำดีของ PKD (25, 28, 31, 39 – 41) พบสิ่งที่ตรงกันข้าม เนื่องจากการก่อตัวของซีสต์อาจรบกวน Wnt/PCP homeostasis ผ่านการสูญเสียสมดุลระหว่างกิจกรรม Wnt ที่เป็นที่ยอมรับและ noncanonical ( 20 , 24 , 29 , 30 , 42 , 43 ) จนถึงขณะนี้ ยังไม่มีการศึกษาใดๆ เพื่อตรวจสอบผลของการยับยั้งการส่งสัญญาณ Wnt แบบบัญญัติตามรูปแบบบัญญัติต่อการสร้างเซลล์ในแบบจำลอง PKD ของหนูเมาส์

การศึกษาหลายชิ้นรายงานว่ายาที่มีแนวโน้มว่าจะมีผลการรักษาที่เป็นไปได้สำหรับ ADPKD ในการทดลองทางคลินิกและพรีคลินิกจำนวนมาก (1, 7, 44 – 54) อย่างไรก็ตาม ยาบางตัวในการทดลองทางคลินิก - ยาที่มีแนวโน้มดีเหล่านี้ ได้แก่ mTOR inhibitors (55, 56), somatostatin analogs (57, 58), ACEI/ARB (59, 60) และ tyrosine kinase inhibitor (61) - ไม่ได้ป้องกัน การลดลงของ EGFR ในผู้ป่วย ADPKD มีเพียง tolvaptan ซึ่งเป็นตัวยับยั้ง vasopressin V2 receptor ซึ่งปัจจุบันได้รับการแสดงเพื่อลดการก่อตัวของซีสต์ของไตและปรับปรุงการทำงานของไต (54, 62) แต่การด้อยค่าของการทำงานของตับและผลข้างเคียงอื่น ๆ ได้รับการท้าทายให้ใช้กันอย่างแพร่หลายในคลินิก ( 63 , 64 ). ดังนั้นจึงมีความจำเป็นเร่งด่วนสำหรับยาชนิดใหม่ที่สามารถยับยั้งการสร้างถุงน้ำดีในผู้ป่วยโรค ADPKD ได้ เราพิจารณาสเปกตรัมของสารยับยั้ง Wnt ที่มีเป้าหมายระดับโมเลกุลต่างๆ ตามเส้นทางการส่งสัญญาณของ Wnt และระบุว่า XAV939 และ LGK974 เป็นสารที่ช่วยลดการสร้างถุงน้ำดี การทำงานของไตที่ดีขึ้น และขยายการรอดชีวิตในแบบจำลองสัตว์ ADPKD ของเรา การศึกษาของเราแสดงหลักฐานที่ชัดเจนเกี่ยวกับความสำคัญของการส่งสัญญาณ β-catenin ใน Pkd2 ฟีโนไทป์ของโรคที่เกี่ยวข้องกับการกลายพันธุ์และอธิบายผลกระทบของสารยับยั้ง Wnt XAV939 และ LGK974 ต่อเป้าหมายการส่งสัญญาณ Wnt ต่างๆ สารยับยั้ง Wnt เหล่านี้เป็นวิธีการรักษาที่มีศักยภาพสำหรับ ADPKD ซึ่งขณะนี้ยังไม่มีการรักษาที่มีประสิทธิภาพ

การลด β-catenin ซึ่งเป็นปัจจัยสำคัญในการส่งสัญญาณ Wnt แบบบัญญัติ ทำให้การสร้างซีสต์ล่าช้าในแบบจำลองเมาส์ของ ADPKD ของมนุษย์ ก่อนหน้านี้เราได้สร้างเซลล์เยื่อบุผิวเฉพาะ Pkd2-เส้นเมาส์ที่น่าพิศวง (วิล เคร Pkd2 หนู f/f หรือเรียกอีกอย่างว่า วิล-เครPkd2 หนู f3/f3) โดยการข้าม วายร้าย-Cre และ Pkd2-หนูขนฟู ( 37 , 65 ) เหล่านี้ Pkd2 หนูกลายพันธุ์เริ่มพัฒนาซีสต์ของไตก่อนอายุ 1 เดือนและมีช่วงชีวิตเฉลี่ย 4 เดือน (65) เนื้อเยื่อไตใน วิล เคร Pkd2 หนู f/f มีระดับของ active, นิวเคลียร์, และ β-catenin ทั้งหมด (Ctnnb1) โปรตีน (รูปที่ 1, A และ B) และโปรตีน Axin2, c-Myc และ cyclin D1 ซึ่งผลิตโดยยีนเป้าหมาย Wnt (รูปที่ 1, C และ D) เมื่อเปรียบเทียบกับหนูควบคุม (Pkd2 f/f ). ผลลัพธ์เหล่านี้สอดคล้องกับรายงานก่อนหน้านี้ว่าการขาด PC2 เพิ่มการส่งสัญญาณ Wnt/β-catenin (27, 37, 66) เพื่อกำหนดความสำคัญของ β-catenin ในฟีโนไทป์ของโรคใน วิล เคร Pkd2 หนู f/f เราข้ามแล้ว วิล เคร Pkd2 f/f เมาส์ ( 65 ) พร้อม Ctnnb1 +/– หนูที่จะสร้าง วิล เคร Pkd2 f/f Ctnnb1 +/– หนูเมาส์ (รูปที่ 2A) การสูญเสียหนึ่ง Ctnnb1 อัลลีลช่วยระดับของ active, นิวเคลียร์, และรวม β-catenin ที่พบในไตของ วิล เคร Pkd2 หนู f/f ลดระดับลงเกือบถึงระดับควบคุม Pkd2 หนู f/f ซึ่งไม่มี วิล-Cre (รูปที่ 1, A และ B). การสูญเสียหนึ่ง Ctnnb1 อัลลีลยังลดระดับที่สูงขึ้นของ Axin2, c-Myc และ cyclin D1 กลับสู่ระดับควบคุม (รูปที่ 1, C และ D) การวิเคราะห์การอยู่รอดของ Kaplan-Meier พบว่า วิล เคร Pkd2 f/f Ctnnb1 +/– หนูมีช่วงชีวิตที่ยืนยาวกว่า วิล เคร Pkd2 เมาส์ f/f (รูปที่ 2B) จุลพยาธิวิทยาเผยให้เห็นซีสต์ของไตน้อยลงและน้อยลงอย่างมากใน วิล เคร Pkd2 f/f Ctnnb1 +/– หนูมากกว่าใน วิล เคร Pkd2 หนูเมาส์ f/f (รูปที่ 2C) การวิเคราะห์ทางเนื้อเยื่อเชิงปริมาณยืนยันว่า วิล เคร Pkd2 f/f Ctnnb1 +/– หนูเมาส์มีดัชนี cystic ของไตต่ำกว่า .อย่างมีนัยสำคัญ วิล เคร Pkd2 เมาส์ f/f (รูปที่ 2D) NS วิล เคร Pkd2 f/f Ctnnb1 +/– หนูยังมีการปรับปรุงอัตราส่วนน้ำหนักไต/ตัวอย่างมีนัยสำคัญ (รูปที่ 2E), พารามิเตอร์การทำงานของไต (รูปที่ 2, F และ G) และการเกิดพังผืดของไต (เอกสารเสริมรูปที่ 1A เสริมพร้อมใช้งานออนไลน์กับบทความนี้ https://doi org/10.1172/jci.insight.95874DS1) เปรียบเทียบกับ วิล เคร Pkd2 หนู f/f เมื่อรวมกันแล้ว ผลลัพธ์เหล่านี้บ่งชี้ว่าระดับ β-catenin สูงขึ้น อันเนื่องมาจากการสูญเสียหน้าที่ Pkd2 การกลายพันธุ์ทำให้เกิดฟีโนไทป์ของโรค ข้อสังเกต เราไม่ได้สังเกตความแตกต่างใดๆ ในสัณฐานวิทยาหรือพารามิเตอร์การทำงานของไตระหว่าง วิล เคร Ctnnb1 +/– หนูและเพื่อนร่วมครอกควบคุม (ไม่แสดงข้อมูล)

ผลของการลดอัลลีลของ Ctnnb1 ยีน. (NS และ NS) การลดอัลลีลของ Ctnnb1 ยีนลดระดับของ β-catenin ที่ออกฤทธิ์ นิวเคลียร์ และทั้งหมด (NS) ตัวแทนของ Western blots ของเนื้อเยื่อ lysates จากไตของ Pkd2 ฉ/ฉ , วิล เคร Pkd2 f/f และ วิล เคร Pkd2 f/f Ctnnb1 แสดงเมาส์ +/– พร้อมกับ (NS) การวิเคราะห์เชิงปริมาณที่ทำให้เป็นมาตรฐานของค่าความหนาแน่นของเนื้อเยื่อที่ทดสอบ ( และ NS) การลดอัลลีลของ Ctnnb1 ยีนยับยั้งการถอดรหัสβ-catenin–mediated (รวมถึง Axin2, c-Myc และ cyclin D1) ที่เปิดใช้งานโดยการขาด PC2 ข้อมูลทั้งหมดแสดงเป็นค่าเฉลี่ย± SEM (*NS < 0.05, **NS < 0.01, ของนักเรียน NS ทดสอบ). ข้อมูลมาจากสัตว์ 3 ตัว/กลุ่ม

Ctnnb1 การลดอัลลีลิกช่วยปรับปรุงฟีโนไทป์ของ ADPKD ใน วิล เคร Pkd2 หนู f/f (NS) แผนภาพแสดงกลยุทธิ์ในการสืบพันธุ์ วิล เคร Pkd2 f/f Ctnnb1 +/– หนู.(NS) การวิเคราะห์การอยู่รอดของ Kaplan-Meier พบว่า วิล เคร Pkd2 f/f Ctnnb1 +/– หนูมีอัตราการรอดชีวิตสูงกว่า .อย่างมีนัยสำคัญ วิล เคร Pkd2 หนู f/f () มิญชวิทยาที่เป็นตัวแทนของส่วนไตจากหนูที่อายุ 1, 2 และ 3 เดือน แท่งมาตราส่วน: 600 μm. (NS และ อี) ดัชนีซีสต์ของไตและอัตราส่วนน้ำหนักของไต/ตัว (NS และ NS) พารามิเตอร์การทำงานของไต: ยูเรียไนโตรเจนในเลือด (BUN) และครีเอตินีน (Cr) ข้อมูลใน NSNS แสดงเป็นค่าเฉลี่ย± SD (*NS < 0.05, **NS < 0.01, ***NS < 0.001, NS = 5 ความแปรปรวน) (ชม และ ผม) การสูญเสียหนึ่ง Ctnnb1 อัลลีลไม่ส่งผลต่อการตายของเซลล์เยื่อบุผิวที่บุด้วยถุงน้ำ (cyst-lining epithelial cells) ตามที่ประเมินโดย caspase-3 และ TUNEL (NS และ K) การสูญเสียหนึ่ง Ctnnb1 อัลลีลลดการแพร่กระจายของเซลล์เยื่อบุผิวที่มีซีสต์ซึ่งตรวจพบโดยการย้อมสี PCNA ลูกศรบ่งบอกถึงการย้อมสี PCNA ในเชิงบวก ข้อมูลใน H–J แสดงเป็นค่าเฉลี่ย± SD (*NS < 0.05, **NS < 0.01, ***NS < 0.001, NS = 3 ความแปรปรวน) แท่งมาตราส่วน: 60 μm.

การส่งสัญญาณ Wnt/β-catenin เกี่ยวข้องกับการควบคุมการเพิ่มจำนวนและการตายของเซลล์ (67 – 70) การตรวจสอบเซลล์เยื่อบุผิวที่มีซิสต์โดยการตัด caspase-3 และการย้อมสี TUNEL พบว่าการสูญเสียอัลลีล β-catenin ไม่ได้เปลี่ยนแปลงการตายของเซลล์ (รูปที่ 2, H และ I และรูปที่ 1B เพิ่มเติม) อย่างไรก็ตามการสูญเสีย Ctnnb1 อัลลีลช่วยการเพิ่มจำนวนที่เพิ่มขึ้นของเซลล์เยื่อบุผิวของไตซีสต์ซับใน วิล เคร Pkd2 หนู f/f กลับการงอกขยายเกือบถึงระดับควบคุม (รูปที่ 2, J และ K) ผลลัพธ์เหล่านี้ชี้ให้เห็นว่า β-catenin ที่เพิ่มขึ้นอาจมีหน้าที่ในการเพิ่มการเพิ่มจำนวนเซลล์เยื่อบุผิวของไตใน วิล เคร Pkd2 หนู f/f

XAV939 ซึ่งยับยั้งการส่งสัญญาณ Canonical Wnt ขัดขวางการเกิด cystogenesis ในไตที่กลายพันธุ์ Pkd2 XAV939 เป็นตัวยับยั้ง Tankyrase มันต่อต้านการส่งสัญญาณ Wnt โดยทำให้โปรตีน Axin เสถียร ดังนั้นจึงเร่งการย่อยสลาย β-catenin (71) ใน วิล เคร Pkd2 หนูเมาส์ f/f, การรักษาด้วย XAV939 (50 มก./กก. ทุกวัน, รูปที่ 3A) เริ่มต้นที่ P10 ลดผลิตภัณฑ์ยีนเป้าหมาย β-catenin และ Wnt ให้อยู่ในระดับที่ควบคุมได้ Pkd2 หนู f/f (รูปที่ 2, A–D) สอดคล้องกับผลต่อการส่งสัญญาณ β-catenin การรักษาด้วย XAV939 ขัดขวางการลุกลามของซีสต์เจเนซิสในไตอย่างมีนัยสำคัญ (รูปที่ 3, B และ C) ลดอัตราส่วนน้ำหนักไต/ร่างกาย (ภาพที่ 3D) และพารามิเตอร์การทำงานของไตที่ดีขึ้น (รูปที่ 3, E และ F) ใน วิล เคร Pkd2 หนู f/f นอกจากนี้ การรักษาด้วย XAV939 ยังลดจำนวนเซลล์เยื่อบุผิวที่บุด้วยถุงน้ำในไตที่เพิ่มจำนวนขึ้น โดยไม่ส่งผลกระทบอย่างมีนัยสำคัญต่อการตายของเซลล์ดังกล่าว (รูปที่ 3, G–J) ที่สำคัญ การรักษานี้ทำให้การรอดชีวิตดีขึ้นอย่างมีนัยสำคัญ (รูปที่ 3K) ข้อมูลเหล่านี้สนับสนุนสมมติฐานที่ยกระดับ β-catenin เนื่องจาก a Pkd2 การกลายพันธุ์ที่สูญเสียการทำงานมีส่วนทำให้เกิดฟีโนไทป์ของโรค

XAV939 ขัดขวางการสร้างซีสต์ใน วิล เคร Pkd2 หนู f/f (NS) แผนภาพแสดงตารางการฉีด XAV939 (NS) ภาพที่เป็นตัวแทนของไตและจุลพยาธิวิทยา แท่งมาตราส่วน: 3 มม. (บน) 600 μm (ด้านล่าง) (C–F) ดัชนีซีสต์ของไต อัตราส่วนน้ำหนักของไต/ตัว และพารามิเตอร์การทำงานของไต ยูเรียไนโตรเจนในเลือด (BUN) และครีเอตินิน (Cr) จุดวงกลมเป็นตัวแทนของหนูที่เป็นตัวแทนของภาพไตและจุลพยาธิวิทยา (NS) ถูกถ่าย (NS และ ชม) XAV939 ไม่มีผลต่อการตายของเซลล์ แต่ (ผม และ NS) ลดการแพร่ขยาย (NS = 3). (K) XAV939 ยืดอายุการอยู่รอดของ .อย่างมีนัยสำคัญ วิล เคร Pkd2 f/f หนู (NS < 0.05) ข้อมูลใน C–J แสดงเป็นค่าเฉลี่ย± SD (*NS < 0.05 **NS < 0.01, ***NS < 0.001, ANOVA).

LGK974 ซึ่งยับยั้งเป้าหมายอื่นของการส่งสัญญาณ Wnt ยังชะลอการเกิด cystogenesis ในไตที่กลายพันธุ์ของ Pkd2 เรายังยืนยันถึงความสำคัญของการส่งสัญญาณ Wnt ที่เพิ่มขึ้นในซิสโตเจเนซิสโดยใช้ตัวยับยั้งการกำเนิดทางชีวภาพของ Wnt LGK974 ซึ่งเป็นตัวยับยั้งเม่นที่ออกฤทธิ์ทางชีวภาพทางปากที่บล็อกการดัดแปลงไขมันของโปรตีน Wnt ที่จำเป็นสำหรับกิจกรรม Wnt (72, 73)เช่นเดียวกับการรักษาด้วย XAV939 การรักษาด้วย LGK974 (3 มก./กก. ต่อวันในทางเดินอาหาร) เริ่มตั้งแต่ P30 (รูปที่ 4A) ช่วยลดระดับของ β-catenin และผลิตภัณฑ์ยีนเป้าหมายที่เพิ่มสูงขึ้นใน วิล เคร Pkd2 หนู f/f (รูปที่ 3, A–D) LGK974 ยังขัดขวางการลุกลามของซีสต์เจเนซิสในไตอย่างมีนัยสำคัญ (รูปที่ 4, B และ C), ลดอัตราส่วนน้ำหนักไต/น้ำหนักตัว (รูปที่ 4D), พารามิเตอร์การทำงานของไตที่ดีขึ้น (รูปที่ 4, E และ F) และลดจำนวนของถุงน้ำที่ขยายพันธุ์ - ซับเซลล์เยื่อบุผิวของไตโดยไม่ส่งผลต่อการตายของเซลล์ใน วิล เคร Pkd2 เมาส์ f/f (รูปที่ 4, G–J) การรักษา LGK974 ยังช่วยยืดอายุขัยของ .ได้อย่างมีนัยสำคัญ วิล เคร Pkd2 เมาส์ f/f (รูปที่ 4K) ดังนั้นเราจึงได้ผลลัพธ์ที่คล้ายคลึงกันมากจากพันธุกรรม Ctnnb1 การลดอัลลีลและการรักษาด้วยสารยับยั้ง Wnt pathway ที่แตกต่างกันสองชนิด

การรักษา LGK974 ทำให้การสร้างซีสต์ล่าช้าใน วิล เคร Pkd2 หนู f/f (NS) แผนภาพแสดงตารางการรักษา LGK974 (NS) ภาพที่เป็นตัวแทนของไตและจุลพยาธิวิทยา แท่งมาตราส่วน: 3 มม. (บน) 600 μm (ด้านล่าง) (C–F) ดัชนีซีสต์ของไต อัตราส่วนน้ำหนักของไต/ตัว และพารามิเตอร์การทำงานของไต ยูเรียไนโตรเจนในเลือด (BUN) และครีเอตินิน (Cr) จุดวงกลมเป็นตัวแทนของหนูที่เป็นตัวแทนของภาพไตและจุลพยาธิวิทยา (NS) ถูกถ่าย (NS และ ชม) LGK974 ไม่มีผลต่อการตายของเซลล์ แต่ (ผม และ NS) ลดการแพร่ขยาย (NS = 3). (K) LGK974 ยืดอายุการอยู่รอดของ วิล เคร Pkd2 f/f หนู (NS < 0.05) ข้อมูลใน C–J แสดงเป็นค่าเฉลี่ย± SD (*NS < 0.05 **NS < 0.01, ***NS < 0.001, ANOVA).

การควบคุมการส่งสัญญาณ Wnt/β-catenin ขึ้นอยู่กับการมีอยู่ของ PC2 ก่อนหน้านี้เราได้สร้างการรวบรวมสายเซลล์เยื่อบุผิวท่อนำไข่จาก WT และ Pkd2 f/− (จีโนไทป์ของมันถือได้ว่าเป็น Pkd2 +/– ) หนูและสร้าง a Pkd2-บรรทัดเซลล์ว่าง (Pkd2 −/− เซลล์) โดยการแปลงค่า Pkd2 f/– เซลล์ที่มี Cre-expressing adenovirus ( 37 , 74 ) เราสังเกตกิจกรรมของยีนนักข่าว Wnt ที่เพิ่มขึ้นและเพิ่มการแสดงออกของยีนเป้าหมาย Wnt Axin2 ใน Pkd2 −/− เซลล์เปรียบเทียบกับเซลล์นั้นใน Pkd2 +/– เซลล์ ( 37 ) เมื่อเซลล์เหล่านี้ได้รับการรักษาด้วย LGK974 ระดับโปรตีนของสารออกฤทธิ์ นิวเคลียส และ β-catenin ทั้งหมดจะลดลงอย่างเห็นได้ชัดใน Pkd2 −/− เซลล์ (รูปที่ 4A เสริม) Axin2, c-Myc และไซคลิน D1 ก็ลดลงเช่นกัน (รูปที่ 4B เสริม) การบำบัดด้วย XAV939 ให้ผลลัพธ์ที่เหมือนกัน (รูปที่ 4, C และ D เพิ่มเติม) ผลลัพธ์เหล่านี้ชี้ให้เห็นว่า PC2 ระงับการส่งสัญญาณ Wnt/β-catenin ในลักษณะอิสระ การสนับสนุนข้อสรุปนี้เพิ่มเติม siRNA-mediated β-catenin silencing ยกเลิกกิจกรรมยีน Wnt ที่เพิ่มขึ้นใน Pkd2 −/− เซลล์ (รูปที่ 4E เสริม)

เพื่อแสดงบทบาทหน้าที่ของการสูญเสีย PC2 ในการเปิดใช้งานการส่งสัญญาณ Wnt/β-catenin เราได้วิเคราะห์การแสดงออกของยีนโดยการวิเคราะห์ microarray ของ WT และ Pkd2 −/− เซลล์ เพื่อยืนยันข้อสรุปก่อนหน้านี้ เราพบว่าการแสดงออกของยีนมีการเปลี่ยนแปลงอย่างมีนัยสำคัญในเส้นทางการส่งสัญญาณ Wnt/β-catenin (รูปที่ 5A เสริม) การวิเคราะห์การแสดงออกของยีนยังเผยให้เห็นการแสดงออกของยีนที่เพิ่มขึ้นของ Ctnnb1 และยีน Wnt หลายตัวใน Pkd2 −/− เซลล์ (รูปเสริมที่ 5B) RT-PCR เชิงปริมาณแสดงให้เห็นว่าการแสดงออกของ Ctnnb1, Wnt7a, และ Wnt9a ถูกยกระดับใน Pkd2 −/− เซลล์เปรียบเทียบกับเซลล์ที่ได้มาจากมารดา Pkd2 +/– เซลล์ ( 37 ) (รูปที่ 5, A–C) เพื่อยืนยันเพิ่มเติมว่าการสูญเสีย PC2 มีส่วนรับผิดชอบในการควบคุม Ctnnb1, Wnt7a, และ Wnt9a, เราแสดงออกถึงความเป็นมนุษย์ PKD2 ใน Pkd2 −/− เซลล์และพบว่าการแสดงออกของยีนเหล่านี้ซึ่งถูกยกระดับในเซลล์ที่ไม่มี PC2 กลับคืนสู่ระดับที่แสดงออกในเซลล์ที่มี PC2 (Pkd2 +/+ หรือ Pkd2 +/– ) (รูปที่ 6 เสริม A–E). PKD2 การแสดงออกซ้ำยังลดการแสดงออกของยีนเป้าหมาย Wnt Axin2, ค-Myc, และ Ccnd1 สู่ระดับปกติ (รูปที่ 6 เสริม, F–H) ผลลัพธ์เหล่านี้บ่งชี้ว่าการเปลี่ยนแปลงที่เราสังเกตเห็นในการแสดงออกของยีน Wnt นั้นขึ้นอยู่กับการมีอยู่ของ PC2 อย่างแท้จริง

การขาด PC2 เพิ่มขึ้น Ctnnb1, Wnt7a, และ Wnt9a การแสดงออก. (A–C) XAV939 ยับยั้งการยกระดับของระดับ mRNA ของ .ที่เกิดจากการขาด PC2 Ctnnb1 แต่ไม่ใช่ของ Wnt7a หรือ Wnt9a. เซลล์ถูกบำบัดด้วย XAV939 (2 ไมโครโมลาร์) เป็นเวลา 16 ชั่วโมง และระดับ mRNA ถูกกำหนดหาโดย RT-PCR เชิงปริมาณ (D–F) LGK974 ยับยั้ง Pkd2 การเพิ่มขึ้นของระดับ mRNA ที่เกิดจากความบกพร่องของ Ctnnb1 แต่ไม่ใช่ของ Wnt7a หรือ Wnt9a. เซลล์ถูกบำบัดด้วย LGK974 (2 ไมโครโมลาร์) เป็นเวลา 24 ชั่วโมง และระดับ mRNA ถูกกำหนดหาโดย RT-PCR เชิงปริมาณ (NS) Wnt7a ระดับ mRNA ใน Pkd2 −/− เซลล์ถูกวัด 48 ชั่วโมงหลังจาก Wnt7a การบำบัดด้วย siRNA โดย RT-PCR เชิงปริมาณ (ชม) Wnt7a ล้มลงลด Pkd2 ระดับความสูงที่เกิดจากข้อบกพร่องของ Ctnnb1 เอ็มอาร์เอ็นเอ (ผม) กิจกรรมของยีนนักข่าว Luciferase เพิ่มขึ้นใน Pkd2 −/− เซลล์ เซลล์ถูกทรานส์เฟกด้วยตัวรายงานลูซิเฟอเรสในการมีอยู่หรือไม่มีอยู่ของ LGK974 (2 ไมโครโมลาร์) และ/หรือ WNT-7a ที่ทำให้บริสุทธิ์จากภายนอก (100 นาโนโมลาร์/มิลลิลิตร) กิจกรรมของยีน Reporter ถูกกำหนด 24 ชั่วโมงหลังจากการถ่ายยีน (NS) Ctnnb1 ระดับ mRNA ยังถูกวัดในการมีอยู่หรือไม่มีอยู่ของ LGK974 และ/หรือ WNT-7a ที่ทำให้บริสุทธิ์จากภายนอกโดย RT-PCR เชิงปริมาณ (K–M) การกักเก็บแคลเซียมภายในเซลล์โดย BAPTA-AM เพิ่มขึ้น Ctnnb1, Wnt7a, และ Wnt9a การแสดงออก. เซลล์ถูกบำบัดด้วยคีเลเตอร์ Ca 2+ BAPTA-AM (0.4 ไมโครโมลาร์) เป็นเวลา 8 ชั่วโมง ข้อมูลแสดงเป็นค่าเฉลี่ย± SEM (*NS < 0.05, **NS < 0.01, ***NS < 0.001, NS = 3 นักเรียน NS ทดสอบ).

นอกจากนี้ เรายังทดสอบด้วยว่าการแสดงออกของ PC2 อาจผิดปกติโดยการรักษาสารยับยั้ง Wnt เหล่านี้ การวิเคราะห์อิมมูโนฟลูออเรสเซนส์พบว่าเฉพาะไตของหนูเมาส์ควบคุมเท่านั้นที่มีการย้อมสีในเชิงบวกอย่างมากในขณะที่ วิล เคร Pkd2 f/f และไตของหนูเมาส์ที่มีหรือไม่มีการบำบัดด้วย XAV939 และ LGK974 แสดงการแสดงออกที่ต่ำอย่างเห็นได้ชัดของ PC2 (รูปที่ 7A เสริม) อย่างไรก็ตาม ไม่พบความแตกต่างที่มีนัยสำคัญในการแสดงออกของ PC2 ระหว่างไตที่มีหรือไม่มีการรักษาด้วย LGK974 และ XAV939 (รูปที่ 7, B และ C เพิ่มเติม) ผลลัพธ์เหล่านี้บ่งชี้ว่าการรักษาสารยับยั้ง Wnt เหล่านี้ไม่ได้เปลี่ยนแปลงการแสดงออกของ PC2 ในร่างกาย

การขาด PC2 เพิ่มการควบคุมการแสดงออกของ Wnt7a และ Wnt9a โดยไม่ขึ้นกับ β-catenin เพื่อตรวจสอบการค้นพบของเราเพิ่มเติม เราได้ดำเนินการ Pkd2 −/− เซลล์และ Pkd2 หนูกลายพันธุ์ที่มีสารยับยั้ง Wnt LGK974 และ XAV939 น่าสนใจ สารยับยั้ง Wnt ทั้งสองถูกระงับ Ctnnb1 นิพจน์ แต่ไม่ส่งผลต่อการแสดงออกของ Wnt7a หรือ Wnt9a (รูปที่ 5, A–F และรูปที่ 8, A–F) นอกจากนี้ a Ctnnb1 การลดอัลลีลไม่ส่งผลต่อระดับความสูงของ Wnt7a หรือ Wnt9a การแสดงออกเนื่องจากการขาด PC2 (รูปที่ 8 เสริม G–I) แสดงว่าการแสดงออกของ Wnt7a และ Wnt9a ไม่ได้ขึ้นอยู่กับ β-catenin เราจึงตรวจสอบหากยับยั้ง Wnt7a (รูปที่ 5G) สามารถเปลี่ยนแปลงนิพจน์ β-catenin ที่เกี่ยวข้องกับ PC2 ได้ แท้จริงการนิ่งเงียบ Wnt7a ช่วยชีวิตระดับ β-catenin ที่เพิ่มขึ้นอย่างผิดปกติใน Pkd2 −/− เซลล์ (รูปที่ 5H) เพื่อยืนยันผลลัพธ์เพิ่มเติม เราได้เตรียมเซลล์เหล่านี้ล่วงหน้าด้วย LGK974 และเพิ่ม Wnt7a ที่บริสุทธิ์แล้ว ผลการศึกษาพบว่า WNT-7a ที่ทำให้บริสุทธิ์จากภายนอกกระตุ้นการทำงานของ Wnt/β-catenin และเพิ่มค่า Ctnnb1 ระดับ mRNA (รูปที่ 5, I และ J) แสดงให้เห็นว่าการปรับ Wnt7a อาจเป็นกลไกที่การสูญเสีย PC2 เพิ่มการส่งสัญญาณ Wnt/β-catenin

เนื่องจาก PC2 เป็น Ca 2+ -modulated cation channel ( 27 , 75 , 76 ) เรายังทดสอบด้วยว่าการคีเลต Ca 2+ ภายในเซลล์ด้วยการบำบัดเซลล์ด้วย BAPTA-AM สามารถเปลี่ยนแปลง Ctnnb1, Wnt7a, และ Wnt9a การแสดงออก. Ca 2+ คีเลชั่นเพิ่มขึ้นอย่างมาก Ctnnb1, Wnt7a, และ Wnt9a การแสดงออกทั้งในเซลล์เยื่อบุผิวไต WT และ Pkd2 −/− เซลล์ (รูปที่ 5, K–M) ซึ่งบ่งชี้ว่า PC2 ควบคุม Ctnnb1, Wnt7a, และ Wnt9a การแสดงออกและการส่งสัญญาณ β-catenin ที่ตามมาโดยการปรับความเข้มข้นของ Ca 2+ ภายในเซลล์

การศึกษาก่อนหน้านี้พบว่า PC2 ร่วมกับสัญญาณ Wnt ทำให้เกิดการไหลเข้าของแคลเซียม และการสูญเสีย PC2 จะรบกวนการโพลาไรซ์ระหว่างการย้ายเซลล์ตามทิศทาง (27, 37, 76) การศึกษานี้แสดงให้เห็นถึงความสำคัญของการส่งสัญญาณ Wnt/β-catenin ที่เพิ่มขึ้นในฟีโนไทป์ของโรคไต polycystic ที่เกิดจาก Pkd2 การกลายพันธุ์ที่สูญเสียการทำงานในหนู ผลลัพธ์ของเราชี้ให้เห็นว่าการสูญเสีย Pkd2 ในเซลล์เยื่อบุผิวของไตกระตุ้นการส่งสัญญาณ Wnt/β-catenin ผ่านการเพิ่มการผลิต autocrine Wnt (เช่น Wnt7a). PC2 ดูเหมือนจะควบคุม Wnt7a และ Wnt9a การแสดงออกโดยการปรับความเข้มข้นของ Ca 2+ ภายในเซลล์ ในขณะที่ PC2 อาจควบคุม Ctnnb1 การแสดงออก อย่างน้อยก็บางส่วน โดยควบคุม Wnt การแสดงออกของยีน ในเซลล์เยื่อบุผิวของไต Wnt7a ไม่เพียงแต่เพิ่มความเสถียรของ β-catenin แต่ยังเพิ่ม Ctnnb1 ระดับ mRNA สารยับยั้ง Wnt ระงับการเพิ่มขึ้นนี้ ยิ่งไปกว่านั้น การปรับลด β-catenin ไม่ว่าจะโดยทางกรรมพันธุ์หรือโดยการบริหาร XAV939 ซึ่งยับยั้งการส่งสัญญาณ Canonical Wnt โดยเฉพาะ ลดลงอย่างมาก Ctnnb1 การแสดงออกและฟีโนไทป์ของซีสติกที่พัฒนาขึ้นในแบบจำลอง ADPKD ของเรา การค้นพบของเราระบุว่าการส่งสัญญาณ Wnt แบบบัญญัตินั้นเกี่ยวข้องกับการสร้างถุงน้ำดีที่เกิดจากการขาด PC2 ด้วย

เราพบว่าการรักษาด้วย BAPTA-AM ซึ่งลด Ca 2+ ภายในเซลล์ เปิดใช้งานการส่งสัญญาณ Wnt คล้ายกับ Pkd2 −/− เซลล์เยื่อบุผิวของไต นอกจากนี้ เราสังเกตเห็นผลเสริมฤทธิ์กันในการส่งสัญญาณ Wnt ที่เป็นที่ยอมรับเมื่อ Pkd2 −/− เซลล์ถูกบำบัดด้วย Ca 2+ คีเลเตอร์ ผลลัพธ์เหล่านี้ชี้ให้เห็นว่า Ca 2+ มีส่วนร่วมในการเปิดใช้งานสัญญาณ Canonical Wnt ที่เกิดจากการบกพร่องของ PC2 (27)

การศึกษาก่อนหน้านี้ชี้ให้เห็นว่าการก่อตัวของซีสต์ใน ADPKD อาจเกิดจากการหลั่งของเหลวมากเกินไปในลูเมนของถุงน้ำ การเพิ่มจำนวนผิดปกติของเยื่อบุผิวของถุงน้ำดี และขั้วเยื่อบุผิวผิดปกติ (1, 3) ยา เช่น vasopressin, triptolide, octreotide และ rapamycin กำหนดเป้าหมายเส้นทางที่เกี่ยวข้องในกระบวนการเหล่านี้ (65, 77 – 79) แม้ว่าโมดูเลเตอร์สัญญาณเหล่านี้ได้แสดงให้เห็นการลดลงของ cystogenesis ในการทดลองทางคลินิก แต่ก็ไม่ได้ช่วยปรับปรุงการทำงานของไตเท่าที่ควร (55, 56, 58, 80 - 82) จากการทดลองทางคลินิกเหล่านี้ มีเพียง tolvaptan เท่านั้นที่มีการปรับปรุงการทำงานของไตมากกว่ายาหลอกในผู้ป่วย ADPKD (62) แต่การใช้งานทางคลินิกส่วนใหญ่ถูกจำกัดโดยผลข้างเคียง (63, 64) การศึกษาในปัจจุบันของเราแสดงให้เห็นอย่างชัดเจนถึงศักยภาพของการส่งสัญญาณ Wnt/β-catenin เป็นเป้าหมายในการรักษาสำหรับ ADPKD

เราแสดงให้เห็นว่าการสูญเสีย PC2 ถูกควบคุม Wnt7a และ Wnt9a ในหลอดทดลองและในร่างกาย Wnt7a และ Wnt9a ได้รับการแสดงเมื่อเร็ว ๆ นี้เพื่อกระตุ้นการส่งสัญญาณ β-catenin (83, 84) สารยับยั้ง Wnt โมเลกุลขนาดเล็กสองตัว XAV939 และ LGK974 ยับยั้งการส่งสัญญาณ Wnt/β-catenin ยืดอายุขัยอย่างมีนัยสำคัญ ปรับปรุงฟีโนไทป์ของ cystic และปรับปรุงการทำงานของไตในรูปแบบเมาส์ของเรา Pkd2- ADPKD ที่เกี่ยวข้อง (รูปที่ 6 และรูปที่ 9) เพิ่มเติม ปัจจุบัน มีการพัฒนาและทดสอบสารยับยั้ง Wnt หลายตัวสำหรับการรักษามะเร็ง ซึ่งรวมถึง XAV939 และ LGK974 การพิจารณาว่าสารยับยั้ง Wnt อื่น ๆ เป็นวิธีการรักษาที่มีประสิทธิภาพสำหรับแบบจำลอง ADPKD หรือผู้ป่วยหรือไม่ และหากเป็นปฏิปักษ์กับ Wnt จะช่วยแก้ไขฟีโนไทป์ของ ADPKD ที่เกี่ยวข้องกับ Pkd1 การกลายพันธุ์หรือปรับปรุงรูปแบบอื่นของ PKD ขณะนี้ยังไม่มีการรักษาทางคลินิกที่น่าพอใจสำหรับ ADPKD ดังนั้นจึงเป็นสิ่งสำคัญที่จะต้องทดสอบประสิทธิภาพของ XAV939 และ LGK974 และเพื่อระบุวิถีโมเลกุล PC2/Wnt/β-catenin ใน ortholog เมาส์ของ ADPKD ของมนุษย์เพื่อประเมินศักยภาพของสารยับยั้ง Wnt เหล่านี้เป็นวิธีการรักษา

ผลของสารยับยั้ง Wnt XAV939 และ LGK974 ต่อวิถีโมเลกุล PC2/Wnt/β-catenin การสูญเสีย PC2 ยกระดับการแสดงออกของ Wnt7a และ Wnt9a นำไปสู่การเปิดใช้งาน β-catenin และการเปิดใช้งานการถอดรหัส β-catenin ในที่สุดสิ่งนี้จะเพิ่มการเพิ่มจำนวนเซลล์เยื่อบุผิวของไตและส่งเสริมการสร้าง cystogenesis การรักษาด้วย XAV939 หรือ LGK974 ยับยั้งการทำงานของ β-catenin และลดการแสดงออกของปัจจัยการส่งสัญญาณ Wnt ที่ปลายน้ำ เช่น Axin2, c-Myc และ cyclin D1 ซึ่งจะช่วยยับยั้งการเพิ่มจำนวนเซลล์ที่ผิดปกติและยับยั้งการเกิด cystogenesis

โมเดลเมาส์และการรักษา โมเดลเมาส์ทั้งหมดที่ใช้ในการศึกษานี้มาจากภูมิหลังทางสายเลือด C57BL/6J Pkd2 หนู f / f ( 37 ) ได้รับการอบรมด้วย วายร้าย-Cre–หนูดัดแปรพันธุกรรมเพื่อสร้าง วิล เคร Pkd2 เมาส์ f/f ( 65 ) หนูที่มีและไม่มี Pkd2 การกลายพันธุ์ถูกจีโนไทป์โดย PCR ของ DNA จีโนมส่วนหางตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ (37) คู่ไพรเมอร์ที่ใช้สำหรับ Pkd2 อัลลีลอยู่ข้างหน้า 5′-TCTGACTTGCAGACTGTGGGG-3′ และย้อนกลับ 5′-AGGTAGGGGAAGGTCAGGGTTGG-3′ NS วิล ทรานส์ยีน Cre ถูกจีโนไทป์โดยการขยายผลิตภัณฑ์ PCR ด้วยไพรเมอร์ที่ต้านบริเวณโปรโมเตอร์ villin-1 ของหนูเมาส์ (ไปข้างหน้า, 5′-GTGTGGGACAGAACAAACCG-3′ และย้อนกลับ, 5′-TGCGAACCTCATCACTCGTTGC-3′) NS Ctnnb1 +/− เส้นเมาส์ถูกสร้างขึ้นโดยการข้าม a Ctnnb1- สายเมาส์ฟล็อกซ์ (Ctnnb1 tm2Kem หรือ Ctnnb1 f2-6 ) จากห้องปฏิบัติการ Jackson ด้วย a Sox2 สายเมาส์ Cre ( 85 )

สำหรับการรักษา XAV939 ชายและหญิง วิล เคร Pkd2 หนูเมาส์ f/f ถูกสุ่มแบ่งออกเป็นสองกลุ่มที่ได้รับ DMSO ของพาหะ (MilliporeSigma) หรือ XAV939 (Seleck) ที่ 50 มก./กก./วัน โดยใช้โปรโตคอลการบำบัดที่แสดงตัวอย่างไว้ในรูปที่ 3A

สำหรับการบำบัดด้วย LGK974, LGK974 ถูกทำสูตรใน 10% (ปริมาตร/ปริมาตร) ซิเตรตบัฟเฟอร์ (pH 2.8)/90% (ปริมาตร/ปริมาตร) ซิเตรตบัฟเฟอร์ (pH 3.0) หรือ 0.5% MC/0.5% ทวีน 80 และบริหารให้โดยทางปากที่ ปริมาตรการให้ยา 10 ไมโครลิตร/กรัม ของน้ำหนักตัวสัตว์ (3 มก./กก./วัน) ชายและหญิง วิล เคร Pkd2 หนูเมาส์ f/f ถูกสุ่มแบ่งออกเป็นสองกลุ่มที่ได้รับยาหลอกหรือ LGK974 (เซลเล็ค) โดยใช้โปรโตคอลการบำบัดที่แสดงตัวอย่างไว้ในรูปที่ 4A

สายเซลล์และวัฒนธรรม NS Pkd2 −/− เซลล์และเซลล์ที่ได้มาจากมารดา Pkd2 เฮเทอโรไซกัส (Pkd2 +/– ) มีการอธิบายบรรทัดเซลล์ก่อนหน้านี้ ( 37 ) สายพันธุ์ของเซลล์ถูกเพาะเลี้ยงใน DMEM/F12 ด้วย 10% FBS เราใช้ shRNA Lentiviral Transduction Particles SHVRSC-TRCN 0000012691 (MilliporeSigma) กับ Pkd2 +/− และ Pkd2 −/− เซลล์เพื่อสร้างความเสถียร Ctnnb1- เส้นเซลล์เงียบ Pkd2 +/− β-cat KD และ Pkd2 −/− β-cat KD (รูปที่ 4E เสริม) โดยใช้แนวทางที่คล้ายกับที่อธิบายไว้ในการศึกษาก่อนหน้าของเรา (86) เพื่อปรับลด Wnt7a การแสดงออกใน Pkd2 −/− สายพันธุ์ของเซลล์ เซลล์ถูกทรานส์เฟกด้วย siRNA ที่มุ่งเป้าไปที่เมาส์อย่างจำเพาะ Wnt7a หรือด้วยการควบคุมเชิงลบ siRNA (ทั้งคู่ซื้อจากซานตาครูซ) โดยใช้ Lipofectamine RNAiMAX Transfection Kit (Invitrogen) ตามคำแนะนำของผู้ผลิต เซลล์ถูกวิเคราะห์โดย qPCR หลังจาก 48 ชั่วโมง

PKD2 ถูกแสดงออกใน Pkd2 −/− เซลล์ที่ใช้ pLV-sfGFP(2A) Puro Lentiviral Vector System (Inovogen) กับมนุษย์เต็มความยาว PKD2 เปิดกรอบการอ่าน cDNA สร้าง ไวรัสลูกผสมถูกบรรจุและขยายขนาดใหญ่ในเซลล์ HEK293 อนุภาค lentiviral ถูกทำให้บริสุทธิ์และใช้ในการแพร่เชื้อ Pkd2 −/− เซลล์ตามคำแนะนำของผู้ผลิต (Addgene)

แอนติบอดีและรีเอเจนต์ มีการใช้แอนติบอดี วัสดุย้อมสี และรีเอเจนต์ต่อไปนี้: กระต่ายโพลีโคลนัลแอนติซีราที่ต้าน D682-V968 ของปลาย PC2 COOH ของมนุษย์ (ชื่อ hPKD2-Cp) ตามที่อธิบายไว้ในการศึกษาก่อนหน้านี้ของเรา (87 ) แอนติบอดีต้าน–β-แอคติน (แค็ตตาล็อก) A5441), แอนติบอดีต้าน α-tubulin (แคตตาล็อก T5201) และ DAPI (แคตตาล็อก D9542) (MilliporeSigma) แอนติบอดีต้าน Axin2 (แคตตาล็อก 2151S), แอนติบอดีต้าน–c-Myc (แคตตาล็อก 13987S), แอนติบอดีต้าน PARP (แคตตาล็อก 9532S ) และแอนติบอดีต้าน caspase-3 (Asp 175) ที่ต้านการแยกตัว (แคตตาล็อก 9664S) (เทคโนโลยีการส่งสัญญาณของเซลล์) แอนติบอดีต้าน–ไซคลิน D1 (แคตตาล็อก sc-70899, ซานตาครูซ) แอนติบอดีต้าน–β-คาเทนินที่ต้านการออกฤทธิ์ (แคตตาล็อก 05-665 เมอร์ค ) และ DeadEnd Fluorometric TUNEL System (แค็ตตาล็อก G3250, Promega) แอนติบอดีทุติยภูมิรวมถึง IgG ต่อต้านกระต่ายของ Cy3 ที่คอนจูเกต (แค็ตตาล็อก AP132C, Millipore Corporation), IgG ต่อต้านเมาส์สำหรับกระต่ายที่คอนจูเกตด้วยเปอร์ออกซิเดส (แคตตาล็อก W4021, Promega) และ IgG ต่อต้านกระต่ายที่คอนจูเกตเปอร์ออกซิเดส (แคตตาล็อก W4011, Promega) ซื้อโปรตีน Recombinant WNT-7a จาก Biolegend (แคตตาล็อก 597902)

หยดตะวันตก เนื้อเยื่อสดหรือเซลล์เพาะเลี้ยงถูกทำให้เป็นเนื้อเดียวกันในบัฟเฟอร์ RIPA (MilliporeSigma) และความเข้มข้นของโปรตีนถูกกำหนดหาโดยการสอบวิเคราะห์ BCA (เพียร์ซ) ตัวอย่างถูกแยกโดย SDS-PAGE และถ่ายด้วยไฟฟ้าไปยังเมมเบรนไนลอน (Perkin Elmer) เมมเบรนถูกบ่มด้วยแอนติบอดีปฐมภูมิที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 4 ชั่วโมงและด้วยแอนติบอดีทุติยภูมิที่คอนจูเกตด้วยเปอร์ออกซิเดสเป็นเวลา 1 ชั่วโมง ตรวจพบแอนติบอดีด้วยเคมีลูมิเนสเซนส์ที่ดีเพิ่มขึ้น (เพียร์ซ) ผลลัพธ์ Western blot ถูกหาปริมาณโดยใช้ค่า densitometry ของแถบอิมมูโนรีแอคทีฟสำหรับโปรตีนเป้าหมาย ปรับให้เป็นมาตรฐานเพื่อควบคุมการโหลด สำหรับ Western blots ตัวอย่างทั้งหมดถูกโหลดซ้ำ และการวิเคราะห์ Western blot ทั้งหมดถูกทำซ้ำอย่างน้อย 3 ครั้ง การวิเคราะห์ทางสถิติอิงจากผลลัพธ์ของตัวอย่างที่ซ้ำกันของการทดลองอย่างน้อย 3 ครั้ง

จุลพยาธิวิทยา อิมมูโนฟลูออเรสเซนซ์ และการย้อมสีแมซสัน ไตรโครม ขั้นตอนการย้อมสีเนื้อเยื่อวิทยาและอิมมูโนฟลูออเรสเซนซ์เป็นไปตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ (37, 88, 89) การย้อมสี Masson trichrome ใช้โปรโตคอลมาตรฐาน ส่วนต่างๆ ถูกกำจัดพาราฟินและนำความชื้นกลับมาใช้ใหม่ผ่านแอลกอฮอล์ 100%, แอลกอฮอล์ 95% และแอลกอฮอล์ 70% แล้วล้างในน้ำกลั่น แก้ไขส่วนต่างๆ ในสารละลายของ Bouin เป็นเวลา 1 ชั่วโมงที่ 56°C ล้างด้วยน้ำประปาที่ไหลเป็นเวลา 5 นาที ย้อมในสารละลายการทำงานของ iron hematoxylin ของ Weigert เป็นเวลา 10 นาที ล้างด้วยน้ำประปาอุ่นเป็นเวลา 10 นาที ล้างในน้ำกลั่น และ ย้อมด้วยสารละลายฟูชซินกรดสีแดงของบีบริชเป็นเวลา 10 นาที ส่วนต่างๆ ถูกบ่มด้วยกรดฟอสโฟทังสติก/ฟอสโฟโมลิบดิกเป็นเวลา 10 นาที หลังจากนั้นจึงทิ้งสารละลายและส่วนต่างๆ ถูกถ่ายโอนโดยตรงไปยังแอนิลีนบลูเป็นเวลา 5 นาทีจากนั้น ล้างส่วนต่างๆ ในน้ำกลั่น ตามด้วยกรดอะซิติก 1% เป็นเวลา 1 นาที หลังจากนั้นจึงทิ้งสารละลายและล้างส่วนต่างๆ ในน้ำกลั่น อบแห้ง ล้างให้สะอาด และปิดฝาไว้ สำหรับกล้องจุลทรรศน์ เราใช้กล้องจุลทรรศน์สำหรับการวิจัย Zeiss Axioplan 2IE และระบบกล้องจุลทรรศน์กลับหัว Zeiss Axiovert 200 พร้อมเลนส์ใกล้วัตถุ ×10, ×20 และ ×40 เราใช้ระบบ Aperio ScanScope (Leica) สำหรับการวิเคราะห์ทางเนื้อเยื่อ ดูและวิเคราะห์กราฟิกดิจิทัลโดยใช้ซอฟต์แวร์โปรแกรมดู ImageScope เวอร์ชัน 12.1.0.5029

การคำนวณดัชนี Cystic เราจับภาพ H&E ตัวแทน 5 ภาพต่อเมาส์ที่ ×200 จากส่วนไตจาก วิล เคร Pkd2 หนู f/f, วิล เคร Pkd2 f/f Ctnnb1 +/– หนูเมาส์ที่ได้รับยาหลอกหรือที่ได้รับ XAV939/LGK974 วิล เคร Pkd2 เมาส์ f/f และการควบคุม Pkd2 หนู f/f รูปภาพถูกเปิดขึ้นในซอฟต์แวร์ Photoshop แปลงเป็นระดับสีเทา และปรับขนาดเป็น 800 × 598 พิกเซล วางตารางไว้เหนือภาพเพื่อสร้างคะแนนรวม 1,064 จุด นับคะแนนที่แบ่งแบ่งครึ่งของเยื่อบุผิวที่เป็นถุงน้ำและเยื่อบุผิวที่ไม่เป็นถุงน้ำ และคำนวณเปอร์เซ็นต์ของคะแนนรวมที่แบ่งแบ่งครึ่งของเยื่อบุผิวที่เป็นถุงน้ำและถุงน้ำดีที่ไม่ใช่ถุงน้ำดี

การขยายพันธุ์และการตายของเซลล์ เพื่อตรวจสอบการเพิ่มจำนวนของเซลล์ ไตได้รับการแก้ไขในพาราฟอร์มัลดีไฮด์บัฟเฟอร์ 4% (MilliporeSigma) ที่ฝังอยู่ในพาราฟินและแบ่งส่วนบนไมโครโทม ส่วนต่างๆ ถูกกำจัดพาราฟฟิไนซ์, ให้น้ำอีกครั้งและล้างใน PBS 3 ครั้งเป็นเวลา 5 นาทีแต่ละส่วน อีพิโทปถูกเปิดออกโดยการดึงข้อมูลด้วยไมโครเวฟด้วยบัฟเฟอร์ซิเตรต (pH 6.0) จากนั้นนำส่วนต่างๆ ไปแช่ในไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์ 3% เป็นเวลา 10 นาทีเพื่อหยุดการทำงานของเปอร์ออกซิเดสภายในร่างกาย ล้างด้วย PBS 3 ครั้ง ครั้งละ 5 นาที และบล็อกด้วย BSA 2% เป็นเวลา 1 ชั่วโมง จากนั้นส่วนต่างๆ ถูกบ่มด้วยแอนติบอดีต้าน PCNA และแอนติ-Ki67 ข้ามคืนที่ 4 °C บ่มด้วยแอนติบอดีทุติยภูมิต้านกระต่ายของแพะที่คอนจูเกต Cy3 และย้อมด้วย DAPI เพื่อระบุนิวเคลียสของเซลล์ การเพิ่มจำนวนถูกวัดโดยการนับนิวเคลียสที่เป็นบวกของ PCNA และ Ki67 บนเยื่อบุผิวที่มีซิสต์ซับ นิวเคลียสถูกนับใน 3 สนามพลังงานสูงสุ่มเลือก (×20) สำหรับแต่ละตัวอย่าง

ตรวจพบการตายของเซลล์โดยใช้ชุดเครื่องมือ DeadEnd Fluorometric TUNEL (Promega) และแอนติบอดี caspase-3 แบบแยกตามคำแนะนำของผู้ผลิต ตัวอย่างไตถูกวางบนสไลด์, ปราศจากพาราฟินและคืนน้ำ, ตรึงในฟอร์มาลดีไฮด์ 4% ใน PBS เป็นเวลา 15 นาที, และจากนั้นทำให้ซึมผ่านด้วยโปรตีน K (แค็ตตาล็อก 740506, Macherey Nagel) เป็นเวลา 10 นาที หลังจากถูกล้างใน PBS ตัวอย่างถูกปรับสมดุลและติดฉลากเป็นเวลา 60 นาที จากนั้นนำตัวอย่างไปแช่ใน ×2 SSC เพื่อหยุดปฏิกิริยาและย้อมทับด้วย DAPI ตรวจพบสัญญาณการตายของเซลล์แบบอะพอพโทซิสโดยกล้องจุลทรรศน์เรืองแสง เซลล์อะพอพโทติกถูกนับในลักษณะเดียวกับเครื่องหมายการงอกขยาย

การวัดค่ายูเรียไนโตรเจนในเลือดและครีเอตินีน ตามข้อบังคับของคณะกรรมการการดูแลและการใช้สัตว์ประจำสถาบันของ Peking Union Medical College หนูทุกตัวได้รับยาสลบด้วยไอโซฟลูเรนก่อนการเจาะหัวใจ ตัวอย่างเลือดถูกหมุนเหวี่ยงและเก็บซีรั่ม วิเคราะห์ระดับยูเรียไนโตรเจน/ครีเอตินีนในเลือดที่ห้องปฏิบัติการทางคลินิกของโรงพยาบาลมะเร็ง สถาบันวิทยาศาสตร์การแพทย์จีน

การวิเคราะห์ไมโครเรย์ การวิเคราะห์ qPCR และการวิเคราะห์เส้นทาง RNA ทั้งหมดถูกสกัดจาก WT และ Pkd2 −/− เซลล์โดยใช้ Trizol reagent (Invitrogen) ตามคำแนะนำของผู้ผลิต ตัวอย่าง RNA ทั้งหมดที่แยกได้ถูกทำให้บริสุทธิ์โดย RNeasy Mini Kit (Qiagen) และ RNA รวม 50 ไมโครกรัมสำหรับแต่ละตัวอย่างถูกส่งไปยังโรงงาน Microarray Core ที่มหาวิทยาลัย Vanderbilt โดยสรุป ตัวอย่าง cRNA ที่ติดฉลาก 10 ไมโครกรัมถูกไฮบริไดซ์บนอาเรย์ Affy Mouse MOE430 (โพรบยีนที่แตกต่างกัน 45,101 ตัว, Affymetrix) โดยใช้โปรโตคอล Microarray Core และ Affymetrix มาตรฐาน ภาพข้อมูลดิบที่สแกนได้รับการประมวลผลด้วยซอฟต์แวร์ปฏิบัติการ GeneChip 1.4 ความเข้มของสัญญาณที่ตั้งค่าโพรบถูกประมวลผลล่วงหน้าและทำให้เป็นมาตรฐานที่ศูนย์ทรัพยากรที่ใช้ร่วมกันของ Vanderbilt Microarray คลัสเตอร์ตามลำดับชั้นที่ไม่ได้รับการดูแลซึ่งมีการงอกขยาย/การตายของเซลล์- และยีนที่สอดคล้องกันที่เกี่ยวข้องกับ Wnt ถูกระบุโดยใช้โปรแกรม TIGR MeV

สำหรับ qPCR RNA ทั้งหมดถูกแยกออกจากเนื้อเยื่อของหนูที่แปลงพันธุ์และหนู WT โดยใช้ Trizol (Invitrogen) cDNA ถูกสร้างขึ้นจาก RNA ทั้งหมด (2 ไมโครกรัม) โดยใช้การถอดรหัสแบบย้อนกลับ SuperScript II ตามโปรโตคอลของผู้ผลิต (Invitrogen) คู่ไพรเมอร์ที่ใช้ในการวิเคราะห์คือ (ไปข้างหน้า) 5′-CACCTCCCAAGTCCTTTATGAATG-3′ และ (ย้อนกลับ) 5′-AGCGTCAAACTGCCGTGGATG-3′ สำหรับเมาส์ Ctnnb1, (ไปข้างหน้า) 5′-CCTGGACGAGTGTCAGTTTCA-3′ และ (ย้อนกลับ) 5′-ATCGCATAGGTGAAGGCCAGC-3′ สำหรับเมาส์ Wnt7a, (ไปข้างหน้า) 5′-GACAACCTCAAGTACAGCAG-3′ และ (ย้อนกลับ) 5′-TTCCACTCCAGCCTTTATCAC-3′ สำหรับเมาส์ Wnt9a, และ (ไปข้างหน้า) 5′-GACCACAGTCCATGCCATCAC-3′ และ (ย้อนกลับ) 5′-TCCACCACCCTGTTGCTGTA-3′ สำหรับ GAPDH เป็นตัวควบคุมการโหลด mRNA ผลิตภัณฑ์ PCR ถูกแยกโดยอะกาโรสเจลอิเล็กโตรโฟรีซิส 1.5% PCR เชิงปริมาณดำเนินการโดยใช้ iCycler iQ Real-Time PCR Detection System กับ iQ SYBR Green Supermix kit (Bio-Rad)

สำหรับการวิเคราะห์เส้นทาง การวิเคราะห์ชุดยีน (GSEA) (http://software.broadinstitute.org/gsea/msigdb) ถูกใช้เพื่ออนุมานหน้าที่เครือข่ายทั่วโลกของยีนที่แสดงความแตกต่างทั้งหมดระหว่าง WT และ Pkd2 −/− เซลล์ GenBank หมายเลขภาคยานุวัติ (NM_013630, BB249222, AI182499, AK004683, AB072311, AB073819, NM_007614, NM_007631, BC006728, AV213413, AK004781, AI323642, BB086994, BB067079, BB398993) และพับยีนแล้วเปลี่ยนเป็นยีน GSEA เพื่อจัดกลุ่มเครือข่ายปฏิสัมพันธ์และหน้าที่ทางชีววิทยาของยีนที่แสดงออกอย่างแตกต่าง ความสำคัญ (NS ค่าทับซ้อน) คำนวณโดยการทดสอบที่แน่นอนของฟิชเชอร์

การทดสอบนักข่าว Luciferase Pkd2 +/− และ Pkd2 −/− เซลล์ ( 37 ) ที่เติบโตในเพลตเพาะเลี้ยง 24 หลุมถูกทรานส์เฟกชั่วคราวด้วยพลาสมิดนักข่าว LEF (30 ng) พลาสมิด LEF (30 ng) พลาสมิด LacZ (160 นาโนกรัม) และพลาสมิด GFP (30 ng) ดีเอ็นเอ (1 ไมโครกรัม) ถูกเติมลงในแต่ละหลุม และเซลล์ถูกคงรักษาไว้ในอาหารที่มีซีรัม กิจกรรมของลูซิเฟอเรสถูกกำหนดโดยใช้ระบบทดสอบลูซิเฟอเรส (โพรเมกา) และลูมิโนมิเตอร์ตามข้อกำหนดของผู้ผลิต กิจกรรมของลูซิเฟอเรสกับตัวรายงาน LEF ถูกทำให้เป็นมาตรฐานของ GFP สำหรับแต่ละเซลล์และวิเคราะห์ทางสถิติ

การทดสอบนักข่าว TOPflash luciferase Pkd2 +/– และ Pkd2 –/– เซลล์ ( 37 ) ที่เติบโตในเพลตเพาะเลี้ยง 12 หลุมถูกทรานส์เฟกชั่วคราวด้วยพลาสมิดนักข่าว TOPflash TCF (0.2 มก.) หรือพลาสมิดรีพอร์ตเตอร์ FOPflash (0.2 มก.) ที่มีตำแหน่งการจับ TCF/LEF ที่กลายพันธุ์ ดีเอ็นเอ (1 ไมโครกรัม) ถูกเติมลงในแต่ละหลุม และเซลล์ถูกคงรักษาไว้ในอาหารที่มีซีรัม เซลล์ถูกเก็บเกี่ยว 24 ชั่วโมงหลังจากการทรานส์เฟกชันใน 100 ไมโครลิตร เซลล์สลายบัฟเฟอร์ (โพรเมกา) กิจกรรมของลูซิเฟอเรสถูกกำหนดโดยใช้ระบบทดสอบลูซิเฟอเรส (โพรเมกา) และลูมิโนมิเตอร์ตามข้อกำหนดของผู้ผลิต กิจกรรมของ Luciferase กับ TOPflash ถูกทำให้เป็นมาตรฐานโดย FOPflash สำหรับแต่ละเซลล์และวิเคราะห์ทางสถิติ

สถิติ. ขนาดกลุ่มที่น้อยที่สุดถูกกำหนดโดยการคำนวณกำลังโดยใช้ชุดเครื่องมือของนักวิจัย DSS ที่มีค่า α เท่ากับ 0.05 และกำลัง 0.8 สัตว์ถูกจัดกลุ่มโดยไม่ปิดบังแต่ถูกสุ่ม และผู้วิจัยถูกปิดบังสำหรับการทดลองคุณสมบัติส่วนใหญ่ ไม่มีตัวอย่างหรือสัตว์ถูกแยกออกจากการวิเคราะห์ สมมติฐานเกี่ยวกับข้อมูล รวมถึงการแจกแจงแบบปกติและความแปรผันที่คล้ายคลึงกันระหว่างกลุ่มทดลอง ได้รับการตรวจสอบความเหมาะสมก่อนทำการทดสอบทางสถิติ การเปรียบเทียบระหว่างสองกลุ่มดำเนินการโดย 2-tailed . ที่ไม่มีการจับคู่ NS การทดสอบและการเปรียบเทียบระหว่างกลุ่มมากกว่าสองกลุ่มดำเนินการโดย ANOVA ทางเดียว ตามด้วยการทดสอบหลังเฉพาะกิจของ Bonferroni โดยใช้ซอฟต์แวร์ Prism 6.0 (GraphPad) การทดสอบทางสถิติใช้การจำลองแบบทางชีวภาพ NS NS ค่าที่น้อยกว่า 0.05 ถือว่ามีนัยสำคัญทางสถิติ

การอนุมัติการศึกษา การทดลองกับสัตว์ทั้งหมดดำเนินการตามระเบียบการที่ได้รับอนุมัติจากคณะกรรมการการดูแลและการใช้สัตว์ประจำสถาบันของวิทยาลัยการแพทย์สหภาพปักกิ่ง

GW, DW และ CL คิดและออกแบบการทดลอง AL, YL, YX, SF, JM และ XS ทำการทดลอง AL, YX, SF, JM, XS, LZ, XZ, QX, DW และ GW วิเคราะห์และตีความข้อมูล AL, GW และ DW เขียนต้นฉบับ


L1 และ B1 ทำซ้ำพิมพ์เขียวการจัดโครงสร้างเชิงพื้นที่ของ chromatin

แม้จะมีการทำแผนที่โครงสร้างโครมาตินสามมิติ (3D) อย่างกว้างขวาง แต่หลักการพื้นฐานที่อยู่เบื้องหลังการพับจีโนมยังไม่ทราบ ที่นี่ เรารายงานบทบาทพื้นฐานของ L1 และ B1 retrotransposons ในการกำหนดโครงสร้างจีโนม 3 มิติมหภาค การรวมกลุ่มแบบโฮโมไทป์ของ B1 และ L1 เกิดขึ้นซ้ำในภายในของนิวเคลียสหรือที่บริเวณรอบนอกของนิวเคลียสและนิวเคลียสตามลำดับ แยกจีโนมออกเป็นส่วนๆ ของนิวเคลียสที่ไม่เกิดร่วมกัน การแบ่งแยกเชิงพื้นที่ของ L1 และ B1 นี้ได้รับการอนุรักษ์ไว้ในเซลล์ของหนูและเซลล์ของมนุษย์ และเกิดขึ้นแบบไดนามิกในระหว่างการสร้างโครงสร้าง 3D chromatin ในการสร้างตัวอ่อนระยะแรกและวัฏจักรของเซลล์ การสูญเสียการถอดเสียงของ L1 จะขัดขวางการกระจายเชิงพื้นที่ของช่องที่มี L1- และ B1-rich อย่างมาก การถอดรหัส L1 มีความสัมพันธ์อย่างยิ่งกับลำดับดีเอ็นเอของ L1 และชักนำให้เกิดการแยกเฟสของโปรตีนเฮเทอโรโครมาติน HP1α ผลลัพธ์ของเราแนะนำว่าการทำซ้ำของจีโนมทำหน้าที่เป็นพิมพ์เขียวของโครงสร้างมหภาคของโครมาติน ดังนั้นจึงอธิบายโครงสร้างลำดับที่สูงกว่าของโครมาตินที่อนุรักษ์ไว้ทั่วทั้งเซลล์ของสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนม


การตรวจทาน 3D Printed Millimeter-Wave and Terahertz Passive Devices

เทคโนโลยีการพิมพ์ 3 มิติกำลังได้รับความสนใจในปัจจุบัน มีข้อดีบางประการเหนือกระบวนการผลิตแบบดั้งเดิม เราให้การทบทวนเทคโนโลยีการพิมพ์ 3 มิติอย่างต่อเนื่องตั้งแต่เริ่มประดิษฐ์ เทคโนโลยีนี้ยังถูกใช้เพื่อสร้างอุปกรณ์แบบพาสซีฟแบบคลื่นมิลลิเมตร (mmWave) และเทระเฮิร์ตซ์ (THz) แม้ว่าจะมีการแสดงให้เห็นผลลัพธ์ที่น่าพึงพอใจ แต่ความท้าทายอยู่ที่การปรับปรุงความทนทานต่อการแปรรูป เช่น ความคลาดเคลื่อนของมิติและความขรุขระของพื้นผิว เราเสนอวิธีการออกแบบอุปกรณ์ระดับสูงเพื่อหลีกเลี่ยงความคลาดเคลื่อนของมิติ และแนะนำการสร้างแบบจำลองเฉพาะของความหยาบผิวของอุปกรณ์ที่พิมพ์ 3 มิติ เป็นที่เชื่อกันว่าด้วยการพัฒนาเทคโนโลยีการพิมพ์ 3 มิติและวิชาที่เกี่ยวข้องในด้านวัสดุศาสตร์และวิศวกรรมเครื่องกล เทคโนโลยีการพิมพ์ 3 มิติจะกลายเป็นกระแสหลักสำหรับการผลิตอุปกรณ์แฝง mmWave และ THz

1. บทนำ

คลื่น Terahertz (THz) หรือคลื่น submillimeter/far-infrared ถูกกำหนดให้เป็นรังสีแม่เหล็กไฟฟ้า (EM) ในความถี่ตั้งแต่ 0.1 ถึง 10 THz ครอบคลุมส่วนใหญ่ของสเปกตรัม EM ระหว่างแถบอินฟราเรดกลางและคลื่นไมโครเวฟ โดเมนสเปกตรัมนี้มีการสั่นสะเทือนของผลึกขัดแตะความถี่ต่ำและการสั่นระหว่างโมเลกุลอื่นๆ ในวัสดุทางเคมีและชีวภาพจำนวนมาก รวมถึงวัตถุระเบิด ยา และชีวโมเลกุลอื่นๆ ก๊าซขั้วโลกจำนวนมากยังมีลายนิ้วมือที่โดดเด่นในสเปกตรัม THz คลื่น THz ที่ดูดซับและสะท้อนกลับของวัสดุเหล่านี้มีข้อมูลที่ไม่สามารถใช้ได้ในช่วงความถี่อื่น ดังนั้นจึงมีการสำรวจ THz อย่างกว้างขวางสำหรับการตรวจจับและการถ่ายภาพ THz เป็นวิธีการที่เป็นไปได้สำหรับการตรวจจับและการถ่ายภาพ ถือว่าปลอดภัยเนื่องจากความสามารถในการเจาะทะลุผ่านสิ่งกีดขวาง เช่น กระดาษ สิ่งทอ เซรามิก ไม้ และหนัง โดยมีการลดทอนเล็กน้อย เทคโนโลยี THz ยังใช้สำหรับการตรวจจับเป้าหมายที่ไม่รุกล้ำและไม่ทำลายภายใต้ที่กำบัง เมื่อเร็ว ๆ นี้ได้มีการตรวจสอบสเปกโทรสโกปี THz และการถ่ายภาพส่วนประกอบที่เกี่ยวข้องกับวัตถุระเบิดเพื่อใช้ในการป้องกัน

เมื่อเทียบกับเทคโนโลยีที่มีการพัฒนาค่อนข้างดีและการใช้งานอย่างแพร่หลายในไมโครเวฟ แถบความถี่กลางอินฟราเรดและออปติคัล การวิจัย การออกแบบ และการพัฒนาเทคโนโลยีในย่านความถี่ THz ยังอยู่ในช่วงเริ่มต้น ระบบ THz สร้างขึ้นจากส่วนประกอบที่ทำงานอยู่และแบบพาสซีฟต่างๆ สำหรับเสาอากาศและอุปกรณ์แบบพาสซีฟอื่น ๆ ขนาดของพวกมันมักจะเป็นสัดส่วนกับความยาวคลื่น ความยาวคลื่นของคลื่น THz EM อยู่ในช่วง 3 mm–30 ไมโครm ซึ่งทำให้อุปกรณ์พาสซีฟ THz มีโปรไฟล์ที่เล็กมาก ขนาดอุปกรณ์ที่แปรผันเล็กน้อยอาจก่อให้เกิดการเปลี่ยนแปลงขนาดใหญ่ของแถบการทำงาน ดังนั้น การผลิตเสาอากาศ THz และอุปกรณ์แบบพาสซีฟจึงต้องใช้กระบวนการที่ซับซ้อนซึ่งมีความทนทานต่อมิติที่เข้มงวด นอกจากนี้ ความขรุขระของพื้นผิวเป็นปัจจัยชี้ขาดที่สำคัญไม่แพ้กันอื่นๆ สำหรับเสาอากาศ THz และอุปกรณ์แบบพาสซีฟ ความหยาบผิวขนาดใหญ่ทำให้สูญเสียการแทรกเพิ่มขึ้น ดังนั้น กระบวนการผลิตของอุปกรณ์แบบพาสซีฟ THz จำเป็นต้องมีการตกแต่งพื้นผิวที่เรียบมาก

วิธีการประดิษฐ์แบบดั้งเดิมของอุปกรณ์แบบพาสซีฟ THz คือการควบคุมเชิงตัวเลขด้วยคอมพิวเตอร์ (CNC) และการตัดเฉือนด้วยไฟฟ้า (EDM) [1, 2] กระบวนการ CNC ใช้เครื่องมือเครื่องจักรที่มีความแม่นยำที่ควบคุมด้วยคอมพิวเตอร์เพื่อตัดส่วนประกอบออกจากวัสดุจำนวนมาก ซึ่งมีการใช้วัสดุต่ำ นอกจากนี้ กระบวนการ CNC ยังต้องการให้ผู้ปฏิบัติงานมีประสบการณ์และทักษะเพียงพอ ซึ่งทำให้ต้นทุนกำลังคนเพิ่มขึ้นอย่างไม่ต้องสงสัย EDM กัดชิ้นงานให้อยู่ในรูปแบบที่ต้องการโดยใช้การปล่อยไฟฟ้า ซึ่งมักใช้สำหรับการตัดเฉือนวัสดุที่มีความแข็งมาก (เช่น โลหะผสมไททาเนียม เหล็กกล้าคาร์บอน และซีเมนต์คาร์ไบด์) ความทนทานในการผลิตนั้นเข้มงวดกว่ากระบวนการ CNC มาก แต่วงจรการประมวลผลนั้นยาวนานกว่าและต้นทุนการประมวลผลก็สูงขึ้น จากที่กล่าวไว้ข้างต้น ต้นทุนแรงงานที่สูง รอบการประมวลผลที่ยาวนาน และการใช้วัสดุต่ำของกระบวนการแบบเดิมเป็นสาเหตุหลักที่ทำให้อุปกรณ์แบบพาสซีฟ THz มีค่าใช้จ่ายสูง ความขัดแย้งระหว่างความต้องการขนาดใหญ่และต้นทุนที่ไม่เอื้ออำนวยของอุปกรณ์ THz เป็นปัญหาเร่งด่วนที่ต้องแก้ไขทั้งในเชิงวิชาการและอุตสาหกรรม

เพื่อตอบสนองความต้องการของการตัดเฉือนที่มีความแม่นยำสูงและลดต้นทุนการผลิต เทคโนโลยีการพิมพ์ 3 มิติจึงเริ่มถูกนำมาใช้ในการผลิตอุปกรณ์ THz การใช้งานส่วนใหญ่ถูกมองว่าเป็นการประดิษฐ์อุปกรณ์แบบพาสซีฟ เช่น ท่อนำคลื่น เสาอากาศแบบแตร และส่วนประกอบแบบโพรง เทคโนโลยีการพิมพ์ 3 มิติใช้วัสดุที่เป็นผงหรือของเหลวเพื่อสร้างส่วนประกอบทีละชั้น การพิมพ์ 3 มิติแตกต่างจากกระบวนการผลิตแบบลดทอน (SM) แบบดั้งเดิม การพิมพ์ 3 มิติเป็นกระบวนการผลิตแบบเติมเนื้อวัสดุ (AM) ที่เป็นมิตรต่อสิ่งแวดล้อม ต้นทุนต่ำ ใช้พลังงานต่ำ และมีความยืดหยุ่นสูง และมีวงจรการประมวลผลสั้น มันมีข้อดีดังต่อไปนี้:

การใช้วัสดุอย่างมีประสิทธิภาพ: วัตถุดิบที่ไม่ผ่านการเผาหรือขึ้นรูปสามารถใช้ซ้ำได้

ต้องการประสบการณ์ของผู้ปฏิบัติงานน้อยลงและทำให้ค่าแรงลดลง

ความยืดหยุ่นสูง: สามารถรับรู้โครงสร้างที่ซับซ้อนซึ่งเป็นไปไม่ได้ที่จะสร้างด้วยกระบวนการแบบเดิม ซึ่งทำให้นักออกแบบมีความยืดหยุ่นมากขึ้น

ระยะเวลาในการดำเนินการสั้น: ช่วยลดระยะเวลาในการเตรียมเครื่องมือและแม่พิมพ์ ทำให้รอบการประมวลผลสั้นลง

ในบทความนี้ เราจะตรวจสอบโดยใช้เทคโนโลยีการพิมพ์ 3 มิติเพื่อสร้างเสาอากาศ THz และอุปกรณ์แบบพาสซีฟ ประการแรก เราจะทบทวนประวัติของเทคโนโลยีการพิมพ์ 3 มิติ จากนั้นระบบจะแนะนำอุปกรณ์แบบพาสซีฟ mmWave และ THz ที่พิมพ์ 3 มิติ ประการที่สาม เราจะอธิบายรายละเอียดเกี่ยวกับปัจจัยสำคัญสำหรับประสิทธิภาพของอุปกรณ์พาสซีฟ mmWave ที่พิมพ์ 3 มิติและ THz ซึ่งเป็นความขรุขระของพื้นผิวและความคลาดเคลื่อนของมิติ สุดท้าย เราจะสรุปบทความเกี่ยวกับแนวโน้มการพัฒนาของการใช้เทคโนโลยีการพิมพ์ 3 มิติสำหรับการผลิตอุปกรณ์แฝง mmWave และ THz

2. ประวัติของเทคโนโลยีการพิมพ์ 3 มิติ

โดยทั่วไป เทคโนโลยีการพิมพ์ 3 มิติสามารถจัดประเภทเป็นการผูกมัดและฝากในแง่ของกระบวนการ และโลหะและไดอิเล็กทริกในแง่ของวัสดุ รูปที่ 1 แสดงประวัติของเทคโนโลยีการพิมพ์ 3 มิติตั้งแต่ถูกประดิษฐ์ขึ้นในปี 1980 เมื่อ Kodama ใช้สิทธิบัตรในการสร้างต้นแบบอย่างรวดเร็ว (RP) ในปี พ.ศ. 2529 ได้มีการออกสิทธิบัตรเกี่ยวกับอุปกรณ์สเตอริโอลิโธกราฟี (SLA) ให้กับฮัลล์ [3] ในปี 1992 Deckard และคณะ จดสิทธิบัตรการเผาผนึกด้วยเลเซอร์แบบคัดเลือก [4] Crump ได้ยื่นจดสิทธิบัตรเกี่ยวกับ fused deposition modeling (FDM) ในปี 1992 [5] ARCAM ก่อตั้งขึ้นในปี 1997 เพื่อพัฒนาเทคโนโลยีการหลอมลำแสงอิเล็กตรอน (EBM) [6] MCP Technologies เปิดตัวการคัดเลือกด้วยเลเซอร์ละลาย (SLM) ในปี 2000 [7]


เชิงนามธรรม

ถ่านกัมมันต์ที่สั่งเปิดใช้งานพร้อมโครงสร้างช่องสัญญาณ (AOMCs-CS) ถูกเตรียมสำเร็จโดยการจัดเก็บCO2 การเปิดใช้งานบน C-FDU-15 ของ mesopore carbon ที่สั่งซื้อ พบว่าเฟรมเวิร์กคาร์บอนต่อเนื่องของสารตั้งต้น C-FDU-15 มีบทบาทสำคัญในการรักษาโครงสร้างลำดับของ AOMCs-CS ที่เป็นผลลัพธ์ การเปิดใช้งานที่ไม่รุนแรง (เช่น การหมดไฟ 31 % โดยน้ำหนัก) ไม่ทำให้ระดับการสั่งซื้อลดลง หลังจากนั้น ระดับการสั่งจะค่อยๆ ลดลงตามการหมดไฟที่เพิ่มขึ้นอีก อย่างไรก็ตาม โครงสร้าง mesostructure หกเหลี่ยมพื้นฐานของ C-FDU-15 ยังคงพบได้ใน AOMCs-CS เมื่อการเผาไหม้ลดลงถึง 73 % โดยน้ำหนัก แม้ว่าผนังคาร์บอนจำนวนมากจะถูกเจาะ และทำให้มีโซพอร์และมาร์โครพอร์ที่ใหญ่กว่าจำนวนมาก เมื่อมีการเผาผลาญเพิ่มขึ้น พื้นที่ผิวและปริมาตรของไมโครพอร์จะเพิ่มขึ้นก่อนแล้วจึงค่อยลดลง และพื้นที่ผิวและปริมาตรของเมโสพอร์จะเพิ่มขึ้นอย่างต่อเนื่อง พื้นที่ผิว Brunaruer−Emmett−Teller (BET) ที่วัดได้สูงสุด ปริมาณ micropore และปริมาตรรูพรุนทั้งหมดของ AOMCs-CS ถึง 2004 m 2 /g, 0.50 cm 3 /g และ 1.22 cm 3 /g ตามลำดับ

สถาบันวัสดุศาสตร์ ห้องปฏิบัติการ PCFM โรงเรียนเคมีและวิศวกรรมเคมี

ควรส่งจดหมายถึงใคร โทรศัพท์: +86-020-84114527 โทรสาร: +86-020-84115112 อีเมล: [email protected]


เชิงนามธรรม

โมโนลิธที่ประกอบด้วยกราฟีนสามมิติ (3D) โดยเฉพาะอย่างยิ่งที่เตรียมโดยการประกอบตัวเองในเฟสของเหลว แสดงถึงรูปแบบที่มีแนวโน้มว่าจะนำไปใช้จริงของกราฟีนได้เนื่องจากมีการใช้พื้นผิวและความสามารถในการปฏิบัติงานสูง อย่างไรก็ตาม ความเข้าใจในกระบวนการประกอบและการควบคุมโครงสร้างของ GA 3 มิติ ซึ่งเป็นวัสดุคาร์บอนประเภทใหม่นั้นไม่เพียงพอ ในมุมมองนี้ เราจะสาธิตกระบวนการประกอบและหารือเกี่ยวกับปัจจัยสำคัญที่เกี่ยวข้องกับการควบคุมโครงสร้างของ 3D GA เพื่อปูทางสำหรับการใช้งานในอนาคต แสดงให้เห็นว่ากระบวนการประกอบเริ่มต้นด้วยการแยกเฟส ซึ่งมีหน้าที่ในการก่อตัวของโครงสร้างเครือข่าย 3 มิติและเฟสของเหลว เนื่องจากตัวเว้นระยะหลีกเลี่ยงการทับซ้อนกันของชั้นกราฟีนขนานกันและช่วยสร้างระบบรูพรุนที่เชื่อมโยงกัน แผ่นกราฟีนที่ได้รับการปรับแต่งอย่างดีและสื่อการประกอบที่เลือกต้องเป็นเงื่อนไขเบื้องต้นสำหรับกระบวนการประกอบและโครงสร้างจุลภาคที่มีการควบคุมอย่างดีของ 3D GA การใช้งานที่มีศักยภาพในการจัดเก็บพลังงานที่มีอัตราสูงและความหนาแน่นของพลังงานเชิงปริมาตรสูงแสดงให้เห็นถึงข้อดีของ 3D GA ในการใช้งานจริง


ดูวิดีโอ: เทยเทยวไทย ตอน 498. เทย Vlog From Home ตอน 3 (อาจ 2022).